problendoПроблемы ЭндокринологииProblems of Endocrinology0375-96602308-1430Endocrinology Research Centre10.14341/probl13129problendo-13129Research ArticleРепродуктивная эндокринологияReproductive EndocrinologyОсобенности стероидогенеза у мужчин с гипогонадизмом при сахарном диабете 2 типаFeatures of steroidogenesis in men with hypogonadism and type 2 diabeteshttps://orcid.org/0000-0002-5386-4289РоживановР. В.RozhivanovR. V.

Роживанов Роман Викторович, д.м.н.

SPIN: 8052-3310

117036, Москва, ул. Дм. Ульянова, д. 11 

Roman V. Rozhivanov, MD, PhD

11 Dm. Ulyanova street, 117036 Moscow

rrozhivanov@mail.ruhttps://orcid.org/0000-0002-7250-4588ЧерноваМ. О.ChernovaM. O.

Чернова Мария Олеговна

eLibrary SPIN: 7765-3872

117036, Москва, ул. Дм. Ульянова, д. 11 

Mariia O. Chernova, MD, PhD-student

11 Dm. Ulyanova street, 117036 Moscow

maryblack22@mail.ruhttps://orcid.org/0000-0001-9002-1662ИоутсиВ. А.IoutsiV. A.

Иоутси Виталий Алексеевич, к.х.н.

eLibrary SPIN: 9734-0997

117036, Москва, ул. Дм. Ульянова, д. 11 

Vitaliy A. Ioutsi, PhD

11 Dm. Ulyanova street, 117036 Moscow

vitalik_org@mail.ruhttps://orcid.org/0000-0002-5634-7877МельниченкоГ. А.Mel’nichenkoG. A.

Мельниченко Галина Афанасьевна, д.м.н., профессор, академик РАН

eLibrary SPIN: 8615-0038

117036, Москва, ул. Дм. Ульянова, д. 11 

Galina A. Mel’nichenko, MD, PhD, Professor

11 Dm. Ulyanova street, 117036 Moscow

teofrast2000@mail.ruhttps://orcid.org/0000-0003-3893-9972ШестаковаМ. В.ShestakovaM. V.

Шестакова Марина Владимировна, д.м.н., профессор, академик РАН

eLibrary SPIN: 7584-7015

117036, Москва, ул. Дм. Ульянова, д. 11 

Marina V. Shestakova, MD, PhD, Professor

11 Dm. Ulyanova street, 117036 Moscow

nephro@endocrincentr.ruhttps://orcid.org/0000-0002-9717-9742МокрышеваН. Г.MokryshevaN. G.

Мокрышева Наталья Георгиевна, д.м.н., профессор, член-корр. РАН

eLibrary SPIN: 5624-3875

117036, Москва, ул. Дм. Ульянова, д. 11 

Natalya G. Mokrysheva, MD, PhD, Professor

11 Dm. Ulyanova street, 117036 Moscow

nm70@mail.ruНациональный медицинский исследовательский центр эндокринологииРоссияEndocrinology Research CentreRussian Federation202216062022683113120Copyright © Роживанов Р.В., Чернова М.О., Иоутси В.А., Мельниченко Г.А., Шестакова М.В., Мокрышева Н.Г., 20222022Роживанов Р.В., Чернова М.О., Иоутси В.А., Мельниченко Г.А., Шестакова М.В., Мокрышева Н.Г.Rozhivanov R.V., Chernova M.O., Ioutsi V.A., Mel’nichenko G.A., Shestakova M.V., Mokrysheva N.G.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://www.probl-endojournals.ru/jour/article/view/13129ОБОСНОВАНИЕ

ОБОСНОВАНИЕ. Сахарный диабет 2 типа (СД2) у мужчин ассоциирован с высокой частотой встречаемости синдрома гипогонадизма. Тестостерон является стероидным гормоном и одним из итоговых метаболитов стероидогенеза, что обуславливает интерес к оценке содержания ключевых стероидных гормонов, их предшественников и метаболитов у мужчин с СД2 в условиях гипо- и эугонадизма.

ЦЕЛЬ

ЦЕЛЬ. Оценка особенностей стероидогенеза у мужчин с гипогонадизмом при СД2 с использованием тандемной масс-спектрометрии.

МЕТОДЫ

МЕТОДЫ. В сплошное одномоментное скрининговое одноцентровое неинтервенционное исследование были включены мужчины с СД2, обратившиеся за медицинской помощью в ФГБУ «НМИЦ эндокринологии» МЗ РФ в период с октября 2021 по январь 2022 г. Проводились изучение анамнеза, физикальный осмотр с определением индекса массы тела, гликированного гемоглобина, измерение ключевых стероидных гормонов, их предшественников и метаболитов методом тандемной масс-спектрометрии. Сравнение групп проведено с помощью U-критерия Манна–Уитни и χ² с поправкой Йейтса. Корреляционный анализ выполнен методом Спирмена. При определении критерия статистической значимости применялась поправка Бонферрони.  

РЕЗУЛЬТАТЫ

РЕЗУЛЬТАТЫ. Пациенты с гипогонадизмом имели статистически значимо более выраженное ожирение по сравнению с мужчинами без гипогонадизма. При сравнительном анализе пациентов в зависимости от наличия гипогонадизма отмечались статистически значимо более низкие показатели предшественников андрогенов 17-гидроксипрегненолона и 17-гидроксипрогестерона у мужчин в группе гипогонадизма. При этом была выявлена положительная статистически значимая корреляция между общим тестостероном и 17-гидроксипрогестероном. Кроме того, 17-гидроксипрогестерон хоть и в меньшей силе, но положительно коррелировал с другими андрогенами — андростендионом (r=0,328; p<0,001) и дегидроэпиандростероном (r=0,183; p=0,004). ЗАКЛЮЧЕНИЕ. В нашем исследовании частота встречаемости гипогонадизма у мужчин с СД2 при определении высокоточным методом тандемной масс-спектрометрии составила 69,5%. Не отмечено влияния заболевания на минералокортикоидное и глюкокортикоидное звенья надпочечникового стероидогенеза. Гипогонадизм ассоциировался со снижением уровня ряда предшественников тестостерона. Наиболее значимым из них являлся 17-гидроксипрогестерон, который может рассматриваться как маркер тестикулярного стероидогенеза. >< 0,001) и дегидроэпиандростероном (r=0,183; p=0,004).

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

ЗАКЛЮЧЕНИЕ. В нашем исследовании частота встречаемости гипогонадизма у мужчин с СД2 при определении высокоточным методом тандемной масс-спектрометрии составила 69,5%. Не отмечено влияния заболевания на минералокортикоидное и глюкокортикоидное звенья надпочечникового стероидогенеза. Гипогонадизм ассоциировался со снижением уровня ряда предшественников тестостерона. Наиболее значимым из них являлся 17-гидроксипрогестерон, который может рассматриваться как маркер тестикулярного стероидогенеза.

BACKGROUND

BACKGROUND: Type 2 diabetes mellitus (DM2) in men is associated with a high incidence of hypogonadism. Testosterone is a steroid hormone and one of the final metabolites of steroidogenesis, which causes interest in assessing the content of key steroid hormones, their precursors and metabolites in hypogonadal and eugonadal men with T2DM.

AIMS

AIMS: Assessment of the features of steroidogenesis in men with hypogonadism in T2DM using tandem mass spectrometry.

MATERIALS AND METHODS

MATERIALS AND METHODS: A full-design, cross-sectional, screening, single-center, non-interventional study included men with T2DM, who were he was treated in Endocrinology Research Centre, Moscow. The study was conducted from October 2021 to January 2022. Medical history assessment, physical examination with determination of body mass index (BMI), measurement of key steroid hormones, their precursors and metabolites by isotope dilution liquid chromatography/tandem mass spectrometry, glycated hemoglobin (HbA1c) were performed. The groups were compared using the Mann-Whitney U-test for quantitative indicators and χ² with Yates’ correction for qualitative ones. Correlation analysis was performed by the Spearman correlation method. When determining the criterion of statistical significance, the Bonferroni correction was applied.

RESULTS

RESULTS: Patients with hypogonadism had statistically significantly more pronounced obesity compared with eugonadal men. In a comparative analysis of patients, depending on the presence of hypogonadism, there were statistically significantly lower levels of androgen precursors 17-hydroxypregnenolone and 17-hydroxyprogesterone in hypogonadal men. At the same time, a positive statistically significant correlation was found between total testosterone and 17-hydroxyprogesterone. In addition, 17-hydroxyprogesterone, although to a lesser extent, but positively correlated with other androgens - androstenedione (r=0,328; p<0,001) and dehydroepiandrosterone (r=0,183; p=0,004). >< 0,001) and dehydroepiandrosterone (r=0,183; p=0,004).

CONCLUSIONS

CONCLUSIONS: In this investigation the prevalence of male hypogonadism in type 2 diabetes, determined by high-precision tandem mass spectrometry, was 69,5%. There was no effect of the disease on the mineralocorticoid and glucocorticoid links of adrenal steroidogenesis. Hypogonadism was associated with decreased levels of a number of testosterone precursors. The most significant of them was 17-hydroxyprogesterone, which can be considered as a marker of testicular steroidogenesis.

мужчинысахарный диабетмасс-спектрометриястероидогенезтестостеронгипогонадизмhypogonadismmentestosteronediabetes mellitusmass-spectrometrysteroidogenesisИсследование выполнено при финансовой поддержке «Безен Хелскеа РУС» (Besins Healthcare RUS).ReferencesMuraleedharan V, Marsh H, Kapoor D, et al. Testosterone deficiency is associated with increased risk of mortality and testosterone replacement improves survival in men with type 2 diabetes. Eur J Endocrinol. 2013;169(6):725-733. doi: https://doi.org/10.1530/EJE-13-0321Muraleedharan V, Marsh H, Kapoor D, et al. Testosterone deficiency is associated with increased risk of mortality and testosterone replacement improves survival in men with type 2 diabetes. Eur J Endocrinol. 2013;169(6):725-733. doi: https://doi.org/10.1530/EJE-13-0321Kumari N, Khan A, Shaikh U, et al. Comparison of testosterone levels in patients with and without type 2 diabetes. Cureus. 2021;169(6):725-733. doi: https://doi.org/10.7759/cureus.16288Kumari N, Khan A, Shaikh U, et al. Comparison of testosterone levels in patients with and without type 2 diabetes. Cureus. 2021;169(6):725-733. doi: https://doi.org/10.7759/cureus.16288Li S, Zhao Y, Yang Y, et al. Metabolic effects of testosterone replacement therapy in patients with type 2 diabetes mellitus or metabolic syndrome: a meta-analysis. Int J Endocrinol. 2020;2020(6):1-12. doi: https://doi.org/10.1155/2020/4732021Li S, Zhao Y, Yang Y, et al. Metabolic effects of testosterone replacement therapy in patients with type 2 diabetes mellitus or metabolic syndrome: a meta-analysis. Int J Endocrinol. 2020;2020(6):1-12. doi: https://doi.org/10.1155/2020/4732021Kumar M, Dutta D, Anne B, et al. Testosterone levels and type 2 diabetes in men: current knowledge and clinical implications. Diabetes, Metab Syndr Obes Targets Ther. 2014;2020(6):481. doi: https://doi.org/10.2147/DMSO.S50777Kumar M, Dutta D, Anne B, et al. Testosterone levels and type 2 diabetes in men: current knowledge and clinical implications. Diabetes, Metab Syndr Obes Targets Ther. 2014;2020(6):481. doi: https://doi.org/10.2147/DMSO.S50777Ding EL, Song Y, Malik VS, Liu S. Sex differences of endogenous sex hormones and risk of type 2 diabetes. JAMA. 2006;295(11):1288. doi: https://doi.org/10.1001/jama.295.11.1288Ding EL, Song Y, Malik VS, Liu S. Sex differences of endogenous sex hormones and risk of type 2 diabetes. JAMA. 2006;295(11):1288. doi: https://doi.org/10.1001/jama.295.11.1288Agarwal P, Singh P, Chowdhury S, et al. A study to evaluate the prevalence of hypogonadism in Indian males with Type2 diabetes mellitus. Indian J Endocrinol Metab. 2017;21(1):64. doi: https://doi.org/10.4103/2230-8210.196008Agarwal P, Singh P, Chowdhury S, et al. A study to evaluate the prevalence of hypogonadism in Indian males with Type2 diabetes mellitus. Indian J Endocrinol Metab. 2017;21(1):64. doi: https://doi.org/10.4103/2230-8210.196008Мельниченко Г.А., Шестакова М.В., Роживанов Р.В. Клиникоэпидемиологические характеристики синдрома гипогонадизма у мужчин с сахарным диабетом 2 типа // Сахарный диабет. — 2019. — Т. 22. — №6. — С. 536-541.Melnichenko GA, Shestakova MV, Rozhivanov RV. The clinical and epidemiological characteristics of hypogonadism in men with type 2 diabetes mellitus. Diabetes Mellitus. 2019;22(6):536-541. (In Russ.)]. doi: https://doi.org/10.14341/DM10211Lapauw B, Kaufman J-M. Management of endocrine disease: Rationale and current evidence for testosterone therapy in the management of obesity and its complications. Eur J Endocrinol. 2020;183(6):R167-R183. doi: https://doi.org/10.1530/EJE-20-0394Lapauw B, Kaufman J-M. Management of endocrine disease: Rationale and current evidence for testosterone therapy in the management of obesity and its complications. Eur J Endocrinol. 2020;183(6):R167-R183. doi: https://doi.org/10.1530/EJE-20-0394Stocco DM, Wang X, Jo Y, Manna PR. Multiple signaling pathways regulating steroidogenesis and steroidogenic acute regulatory protein expression: more complicated than we thought. Mol Endocrinol. 2005;19(11):2647-2659. doi: https://doi.org/10.1210/me.2004-0532Stocco DM, Wang X, Jo Y, Manna PR. Multiple signaling pathways regulating steroidogenesis and steroidogenic acute regulatory protein expression: more complicated than we thought. Mol Endocrinol. 2005;19(11):2647-2659. doi: https://doi.org/10.1210/me.2004-0532Payne AH, Hales DB. Overview of steroidogenic enzymes in the pathway from cholesterol to active steroid hormones. Endocr Rev. 2004;25(6):947-970. doi: https://doi.org/10.1210/er.2003-0030Payne AH, Hales DB. Overview of steroidogenic enzymes in the pathway from cholesterol to active steroid hormones. Endocr Rev. 2004;25(6):947-970. doi: https://doi.org/10.1210/er.2003-0030Jannetto PJ, Fitzgerald RL. Effective use of mass spectrometry in the clinical laboratory. Clin Chem. 2016;62(1):92-98. doi: https://doi.org/10.1373/clinchem.2015.248146Jannetto PJ, Fitzgerald RL. Effective use of mass spectrometry in the clinical laboratory. Clin Chem. 2016;62(1):92-98. doi: https://doi.org/10.1373/clinchem.2015.248146Vesper HW, Bhasin S, Wang C, et al. Corrigendum to “Interlaboratory comparison study of serum total testosterone measurements performed by mass spectrometry methods”. Steroids. 2009;74(9):791. doi: https://doi.org/10.1016/j.steroids.2009.05.001Vesper HW, Bhasin S, Wang C, et al. Corrigendum to “Interlaboratory comparison study of serum total testosterone measurements performed by mass spectrometry methods”. Steroids. 2009;74(9):791. doi: https://doi.org/10.1016/j.steroids.2009.05.001Малышева Н.М., Колесникова Г.С., Иоутси В.А., и др. Сравнительный анализ результатов определения тестостерона в сыворотке крови на анализаторах Architect и Vitros и методом высокоэффективной жидкостной хроматографии — тандемной масс-спектрометрии. — Клиническая лабораторная диагностика. — 2017. — Т. 62. — №10. — С. 592-599.Malysheva NM, Kolesnikova GS, Ioutsi VA, et al. The comparative analysis of the results of detection of testosterone in blood serum applying analyzers Architect and Vitros and tandem massspectrometry, a highly efficient fluid chromatography techniquedoi. Russian Clinical Laboratory Diagnostics. 2017;62(10):592-599. (In Russ.). doi: https://doi.org/10.18821/0869-2084-2017-62-10-592-599.Tai SSC, Xu B, Welch MJ, Phinney KW. Development and evaluation of a candidate reference measurement procedure for the determination of testosterone in human serum using isotope dilution liquid chromatography/tandem mass spectrometry. Anal Bioanal Chem. 2007;388(5-6):1087-1094. doi: https://doi.org/10.1007/s00216-007-1355-3Tai SSC, Xu B, Welch MJ, Phinney KW. Development and evaluation of a candidate reference measurement procedure for the determination of testosterone in human serum using isotope dilution liquid chromatography/tandem mass spectrometry. Anal Bioanal Chem. 2007;388(5-6):1087-1094. doi: https://doi.org/10.1007/s00216-007-1355-3Botelho JC, Shacklady C, Cooper HC, et al. Isotope-Dilution Liquid Chromatography–Tandem Mass Spectrometry Candidate Reference Method for Total Testosterone in Human Serum. Clin Chem. 2013;59(2):372-380. doi: https://doi.org/10.1373/clinchem.2012.190934Botelho JC, Shacklady C, Cooper HC, et al. Isotope-Dilution Liquid Chromatography–Tandem Mass Spectrometry Candidate Reference Method for Total Testosterone in Human Serum. Clin Chem. 2013;59(2):372-380. doi: https://doi.org/10.1373/clinchem.2012.190934Алгоритмы специализированной медицинской помощи больным сахарным диабетом (9-й выпуск , дополненный) / Под ред. И.И. Дедова, М.В. Шестаковой, А.Ю. Майорова. — М.; 2019.Algoritmy spetsializirovannoi meditsinskoi pomoshchi bol’nym sakharnym diabetom (9-i vypusk, dopolnennii). Ed. by II Dedov, MV Shestakova, AYu Mayorov. Moscow; 2019. (In Russ.). doi: https://doi.org/10.14341/DM221S1Cheung KK, Luk AO, So WY, et al. Testosterone level in men with type 2 diabetes mellitus and related metabolic effects: a review of current evidence. J Diabet Investig. 2015;6(2):112-123. doi: https://doi.org/10.1111/jdi.12288.Cheung KK, Luk AO, So WY, et al. Testosterone level in men with type 2 diabetes mellitus and related metabolic effects: a review of current evidence. J Diabet Investig. 2015;6(2):112-123. doi: https://doi.org/10.1111/jdi.12288.Rozhivanov RV, Essaoulenko DI, Kalinchenko SY. The prevalence of hypogonadism in patients with diabetes mellitus type 2 (DMT2). The Aging Male. 2006;9(1):27.Rozhivanov RV, Essaoulenko DI, Kalinchenko SY. The prevalence of hypogonadism in patients with diabetes mellitus type 2 (DMT2). The Aging Male. 2006;9(1):27.Дедов И.И., Мельниченко Г.А., Роживанов Р.В., Курбатов Д.Г. Рекомендации по диагностике и лечению дефицита тестостерона (гипогонадизма) у мужчин // Проблемы эндокринологии. — 2016. — Т. 62. — №6. — С. 78-80.Dedov II, Melnichenko GA, Rozhivanov RV, Kurbatov DG. Guidelines for the Diagnosis and Treatment of testosterone deficiency (hypogonadism) in male patients. Problems of Endocrinology. 2016;62(6):78-80. (In Russ.). doi: https://doi.org/10.14341/probl201662678-80Antonio L, Wu FCW, O’Neill TW, et al. Associations Between Sex Steroids and the Development of Metabolic Syndrome: A Longitudinal Study in European Men. J Clin Endocrinol Metab. 2015;100(4):1396-1404. doi: https://doi.org/10.1210/jc.2014-4184.Antonio L, Wu FCW, O’Neill TW, et al. Associations Between Sex Steroids and the Development of Metabolic Syndrome: A Longitudinal Study in European Men. J Clin Endocrinol Metab. 2015;100(4):1396-1404. doi: https://doi.org/10.1210/jc.2014-4184.Савельева Л.В., Роживанов Р.В., Шурдумова Б.О., Фадеев В.В. Нормогонадотропный гипогонадизм у мужчин с ожирением // Ожирение и метаболизм. — 2009. — Т. 6. — №3. — С. 39-42Savel’eva LV, Rozhivanov RV, Shurdumova BO, Fadeev VV. Normogonadotropic hypogonadism in men with obesity. Obesity and metabolism. 2009;6(3):39-42. (In Russ.). doi: https://doi.org/10.14341/2071-8713-5243.Dhindsa S, Miller MG, McWhirter CL, et al. Testosterone concentrations in diabetic and nondiabetic obese men. Diabetes Care. 2010;33(6):1186-1192. doi: https://doi.org/10.2337/dc09-1649Dhindsa S, Miller MG, McWhirter CL, et al. Testosterone concentrations in diabetic and nondiabetic obese men. Diabetes Care. 2010;33(6):1186-1192. doi: https://doi.org/10.2337/dc09-1649Kim SC, Ahn SY, Park SH, et al. A comparison of the relaxation responses of isolated cavernosal smooth muscles by endotheliumindependent and endothelium-dependent vasodilators in diabetic men with impotence. J. Korean Med. Sci. 1995:10(1):1-6. doi: https://doi.org/10.3346/jkms.1995.10.1.1Kim SC, Ahn SY, Park SH, et al. A comparison of the relaxation responses of isolated cavernosal smooth muscles by endotheliumindependent and endothelium-dependent vasodilators in diabetic men with impotence. J. Korean Med. Sci. 1995:10(1):1-6. doi: https://doi.org/10.3346/jkms.1995.10.1.1Cunningham MJ, Clifton DK, Steiner RA. Leptin’s Actions on the Reproductive Axis: Perspectives and Mechanisms. Biol Reprod. 1999;60(2):216-222. doi: https://doi.org/10.1095/biolreprod60.2.216Cunningham MJ, Clifton DK, Steiner RA. Leptin’s Actions on the Reproductive Axis: Perspectives and Mechanisms. Biol Reprod. 1999;60(2):216-222. doi: https://doi.org/10.1095/biolreprod60.2.216Richardson D, Vinik A. Etiology and treatment of erectile failure in diabetes mellitus. Curr Diab Rep. 2002;2(6):501-509. doi: https://doi.org/10.1007/s11892-002-0120-4Richardson D, Vinik A. Etiology and treatment of erectile failure in diabetes mellitus. Curr Diab Rep. 2002;2(6):501-509. doi: https://doi.org/10.1007/s11892-002-0120-4Goodfriend TL, Egan BM, Kelley DE. Aldosterone in obesity. Endocr Res. 1998;24(3-4):789-796. doi: https://doi.org/10.3109/07435809809032689Goodfriend TL, Egan BM, Kelley DE. Aldosterone in obesity. Endocr Res. 1998;24(3-4):789-796. doi: https://doi.org/10.3109/07435809809032689Мазурина Н.В., Ершова Е.В., Трошина Е.А., и др. Жировая ткань и функция надпочечников: механизмы взаимного влияния // Медицинский совет. — 2019. — №4. — С. 70-77.Mazurina NV, Ershova EV, Troshina EA, et al. Fat tissue and adrenal function: mechanisms of mutual influence. Med Counc. 2019;12(4):70-77. (In Russ.). doi: https://doi.org/10.21518/2079-701X-2019-4-70-77Li X, Zhu Q, Wen Z, et al. Androgen and Luteinizing Hormone Stimulate the Function of Rat Immature Leydig Cells Through Different Transcription Signals. Front Endocrinol (Lausanne). 2021;12(1-2):31-39. doi: https://doi.org/10.3389/fendo.2021.599149Li X, Zhu Q, Wen Z, et al. Androgen and Luteinizing Hormone Stimulate the Function of Rat Immature Leydig Cells Through Different Transcription Signals. Front Endocrinol (Lausanne). 2021;12(1-2):31-39. doi: https://doi.org/10.3389/fendo.2021.599149Lefèvre A, Rogier E, Astraudo C, et al. Regulation by retinoids of luteinizing hormone/chorionic gonadotropin receptor, cholesterol side-chain cleavage cytochrome P-450, 3β-hydroxysteroid dehydrogenase/Δ5−4-isomerase and 17α-hydroxylase/C17–20 lyase cytochrome P-450 messenger ribonucleic acid l. Mol Cell Endocrinol. 1994;106(1-2):31-39. doi: https://doi.org/10.1016/0303-7207(94)90183-XLefèvre A, Rogier E, Astraudo C, et al. Regulation by retinoids of luteinizing hormone/chorionic gonadotropin receptor, cholesterol side-chain cleavage cytochrome P-450, 3β-hydroxysteroid dehydrogenase/Δ5−4-isomerase and 17α-hydroxylase/C17–20 lyase cytochrome P-450 messenger ribonucleic acid l. Mol Cell Endocrinol. 1994;106(1-2):31-39. doi: https://doi.org/10.1016/0303-7207(94)90183-XGuo H, Luo X, Sun L, et al. Cyclin-dependent kinase inhibitor 1B acts as a novel molecule to mediate testosterone synthesis and secretion in mouse Leydig cells by luteinizing hormone (LH) signaling pathway. Vitr Cell Dev Biol — Anim. 2021;57(7):742-752. doi: https://doi.org/10.1007/s11626-021-00545-xGuo H, Luo X, Sun L, et al. Cyclin-dependent kinase inhibitor 1B acts as a novel molecule to mediate testosterone synthesis and secretion in mouse Leydig cells by luteinizing hormone (LH) signaling pathway. Vitr Cell Dev Biol — Anim. 2021;57(7):742-752. doi: https://doi.org/10.1007/s11626-021-00545-xNaas H, de Oliveira AA, Karpova T, Nunes KP. Toll-like receptor 4 (TLR4) as a possible pathological mechanism in hyperglycemia-associated testicular dysfunction. Med Hypotheses. 2019;127(3):116-119. doi: https://doi.org/10.1016/j.mehy.2019.04.010Naas H, de Oliveira AA, Karpova T, Nunes KP. Toll-like receptor 4 (TLR4) as a possible pathological mechanism in hyperglycemia-associated testicular dysfunction. Med Hypotheses. 2019;127(3):116-119. doi: https://doi.org/10.1016/j.mehy.2019.04.010Yao B, Liu HY, Gu YC, et al. Gonadotropin-releasing hormone positively regulates steroidogenesis via extracellular signal-regulated kinase in rat Leydig cells. Asian J Androl. 2011;13(3):438-445. doi: https://doi.org/10.1038/aja.2010.158Yao B, Liu HY, Gu YC, et al. Gonadotropin-releasing hormone positively regulates steroidogenesis via extracellular signal-regulated kinase in rat Leydig cells. Asian J Androl. 2011;13(3):438-445. doi: https://doi.org/10.1038/aja.2010.158Penell JC, Kushnir MM, Lind L, et al. Concentrations of nine endogenous steroid hormones in 70-year-old men and women. Endocr Connect. 2021;10(5):511-520. doi: https://doi.org/10.1530/EC-21-0045Penell JC, Kushnir MM, Lind L, et al. Concentrations of nine endogenous steroid hormones in 70-year-old men and women. Endocr Connect. 2021;10(5):511-520. doi: https://doi.org/10.1530/EC-21-0045Lima TFN, Patel P, Blachman-Braun R, et al. Serum 17-hydroxyprogesterone is a potential biomarker for evaluating intratesticular testosterone. J Urol. 2020;204(3):551-556. doi: https://doi.org/10.1097/JU.0000000000001016Lima TFN, Patel P, Blachman-Braun R, et al. Serum 17-hydroxyprogesterone is a potential biomarker for evaluating intratesticular testosterone. J Urol. 2020;204(3):551-556. doi: https://doi.org/10.1097/JU.0000000000001016Chu KY, Achua JK, Ramasamy R. Strategies to increase testosterone in men seeking fertility. Türk Üroloji Dergisi/Turkish J Urol. 2020;26(7):1017-1032. doi: https://doi.org/10.5152/tud.2020.20436Chu KY, Achua JK, Ramasamy R. Strategies to increase testosterone in men seeking fertility. Türk Üroloji Dergisi/Turkish J Urol. 2020;26(7):1017-1032. doi: https://doi.org/10.5152/tud.2020.20436

The authors declare that there are no conflicts of interest present.