Эксперименты выполнены на 14 собаках (7 интактных и 7 с удаленной поджелудочной железой) массой 9—12 кг, а также на 30 крысах-самцах массой 300 г. Эксперименты проводились согласно лабораторным правилам доклинических исследований РФ (ГОСТ 351000.3-96;51000.4-96). Использовались субстанция препарата "Диабета" (перорально, 280 мг/кг); инсулин "Актрапид НМ" ("Ново- Нордиск", Дания, внутривенно 0,4 Ед/кг); мальтоза (перорально, 3 г/кг), гликлазид ("Сервье", Франция; 8 мг/кг), акарбоза ("Bayer AG", Германия; 10 мг/кг). Глюкозу определяли в цельной крови ферментативным способом, используя наборы "Глюкоза ФКД" (Россия). Концентрацию инсулина в плазме определяли на автоматическом иммуно- ферментном анализаторе "SUNRISE" (Австрия).

При изучении влияния препарата "Диабета" на секрецию инсулина проведено 4 серии исследований: I серия — изучение влияния препарата "Диабета" на гликемию и результаты глюкозотолерантного теста у интактных собак (3 г/кг), II серия — изучение влияния "Диабета" на эффект экзогенного инсулина у панкреатэктомированных собак по схеме В. A. Houssay, III серия — изучение влияния "Диабета" на утилизацию углевода периферическими тканями (о чувствительности мышечной ткани к инсулину судили по количеству глюкозы, поглощенной изолированной диафрагмой крыс после 30-дневного введения препарата "Диабета"), IV серия — изучение влияния "Диабета" на всасывание мальтозы в кишечнике крыс (по площади под кривой гликемии). Результаты обрабатывали в программе Microsoft Excel 6,0. Критический уровень значимости при проверке статистических гипотез равнялся 0,05.

Рис. 1. Зависимость концентрации инсулина в плазме от времени после перорального введения препарата "Диабета" (280 мг/кг) интактным собакам (М + т).

Результаты и их обсуждение

Через 60 мин после введения "Диабета" интактным собакам регистрировалось снижение уровня глюкозы на 31,5% (/? < 0,002). Начало сахароснижающего действия отмечено через 30 мин, а к концу 1-го часа достигало максимума (16,2 мкЕД/мл). Уровень инсулина, возрастая в течение 1-го часа, в дальнейшем несколько снижался (рис. 1).

После перорального введения глюкозы в крови интактных собак наблюдалось резкое увеличение концентрации сахара в крови (в 1,9 раза) и выброса инсулина в кровь (в 3 раза). Через 2 ч после введения препарата "Диабета" подъем гликемии в ходе глюкозотолерантного теста был меньше, а степень и продолжительность гиперинсулинемии на 31,1% больше (р < 0,002). У животных с удаленной поджелудочной железой на фоне высокой гипергликемии (23—26 ммоль/л) и полного отсутствия инсулина в плазме "Диабета" практически не оказывал гипогликемического действия.

Однако у панкреатэктомированных собак, получавших инсулин, с 30-й минуты эксперимента регистрировалось снижение гликемии; к 3-му часу эффект достигал максимального значения — 44,3% (р < 0,003) (рис. 2). Аналогичный эффект наблюдался у панкреатэктомированных животных, получавших гликлазид.

Рис. 2. Влияние препарата "Диабета" (280 мг/кг) и гликлазида (8 мг/кг) на концентрацию глюкозы в крови после ее перорального введения панкреатэктомированным животным на фоне инъекций инсулина (0,4 ЕД/кг) (М + т).

По оси абсцисс — время (в минутах); по оси ординат — изменения содержания глюкозы в крови относительно исходных показателей (в %).

Таким образом, препарат "Диабета" стимулирует секрецию инсулина р-клетками интактных животных и потенцирует действие экзогенного инсулина и гликлазида.

При инкубации диафрагмы интактных крыс в течение 2 ч в растворе Кребса—Рингера содержание глюкозы в среде снижалось на 2,2%, а при добавлении к инкубационной среде инсулина — на 18,8% (рис. 3). После курсового введения "Диабета" было зафиксировано снижение уровня глюкозы в среде на 19,1% в пробах без инсулина, и на 26,4% в присутствии инсулина (р < 0,05).

Таким образом, применение препарата "Диабета" в течение 30 дней увеличивает поглощение глюкозы изолированной диафрагмой крыс, даже в отсутствие инсулина, и потенцирует действие инсулина. Возможно "Диабета" ускоряет или поддерживает рециклирование транспортеров глюкозы через мембрану мышечных клеток.

Рис. 3. Влияние перорального введения препарата "Диабета" на поглощение глюкозы изолированной диафрагмой крыс. Newman—Keuls test (р < 0,05).

Рис. 4. Влияние препарата "Диабета" (280 мг/кг) и акарбозы (10 мг/кг) на гликемию у крыс после пероральной нагрузки мальтозой (3 г/кг).

При пероральном введении мальтозы крысам наблюдалось резкое увеличение концентрации глюкозы в крови, достигающее максимума к 1-му часу исследования. Это обусловлено расщеплением олигосахарида до моносахаридов а-глюкозида- зами слизистой оболочки. Препарат "Диабета" снижает скорость и интенсивность всасывания продуктов метаболизма мальтозы (рис. 4), не уступая по активности акарбозе. Площадь под кривой концентрация глюкозы—время" под действием "Диабета" снижалась на 24,02%, а под действием акарбозы — на 28,78%. По-видимому, данные эффекты связаны с замедлением последовательных процессов ферментирования и всасывания углеводов в тонкой кишке [3].

Полученные результаты подтверждают имеющиеся данные [4], согласно которым тритерпеновые глюкурониды, содержащиеся в экстракте Гимнемы лесной, подавляют транспорт глюкозы в эпителиальных клетках, ингибируя натрий-зависимый переносчик глюкозы.