В современной литературе широко представлены работы, посвященные оценке иммунологических нарушений при сахарном диабете (СД) [1, 2, 5]. При этом проводимые исследования количества и функциональных свойств клеток касаются зрелых лимфоцитов, образование которых происходит из прекурсорных лимфоцитов. В условиях патологии компенсация иммунологических нарушений может быть достигнута за счет прекурсорных клеток, обладающих в большей или меньшей степени функциональной плюрипотентностью [10]. Существует точка зрения, согласно которой изменения клеточного иммунитета при СД имеют большее значение, чем нарушения гуморального иммунитета [11]. Показано, что при СД I типа (инсулинзависимый) снижено общее количество Т-лимфоцитов [4], снижена активность Т-супрессоров [9, 12], увеличено содержание активированных Т-лимфоцитов [8] и Т-хелперов [б], нарушена продукция Т-лимфоцитами интерлейкина-2 [13]. Следует отметить, что выявляемые изменения зависят от фазы компенсации СД, длительности его течения, возраста возникновения заболевания и других факторов 115]. Установлено, что аутологичная смешанная реакция лимфоцитов характеризует процессы дифференцировки Т-лимфоцитов, а у больных с впервые выявленным СД I типа эта реакция значительно нарушена [14]. Изменения клеточного иммунитета при СД II типа (инсулиннезависи- мый) или отсутствуют или незначительны [1].

С учетом выявляемых при СД изменений клеточного звена иммунной системы становится актуальной проблема особенностей дифференцировки Т-лимфоцитов. Для ее решения проведена количественная оценка Т-прекурсорных клеток при разных формах СД в сравнении со здоровыми людьми с использованием методики Е-розет- кообразования в присутствии активатора дифференцировки Т-лимфоцитов Т-активина [3].

Материалы и методы

Использована периферическая кровь 35 больных СД I типа в возрасте 17-36 лет с давностью заболевания от 3 до 15 лет без сопутствующих заболеваний, получающих инъекции инсулинов короткого и пролонгированного действия; 17 больных СД II типа в возрасте 54-60 лет с давностью заболевания от 8 до 26 лет с сопутствующими СД гипертонической болезнью, ишемической болезнью сердца, хроническим холециститом, из которых 10 человек принимают сахаропонижающие препараты из группы сульфаниламидов, а 7 человек в течение последних 7-10 лет получают инъекции инсулина; 6 больных в возрасте 58-64 лет с панкреатогенным СД и 20 доноров в возрасте от 22 до 45 лет. Больные поступали в клинику в связи с декомпенсацией СД. Кровь на исследование брали натощак при поступлении и у части больных перед выпиской. С целью уточнения диагноза и фазы компенсации СД изучали суточный гликемический профиль, биохимические показатели, проводили анализ мочи на сахар и ацетон, запись ЭКГ. реовазографию, абдоминальное ультразвуковое исследование, оценку функции почек (общий анализ мочи, анализы по Нечипоренко и Зимиицкому, проба-Реберга), осмотр окулистом и невропатологом. Разделение больных СД на группы проводили на основе классификации, предложенной Комитетом экспертов ВОЗ по СД (1981).

У всех больных СД и у доноров определяли количество разных предшественников Т-лимфоцитов: аугорозеткообра- зующих клеток (ауто-РОК), преауто-РОК, пре-Т-лимфоцитов. Ауто-РОК характеризуют посттимические прекурсор) 1ые Т-лимфоциты, образующие розетки с собственными эритроцитами, преауго-РОК сосредоточены среди Т-клеток и в присутствии Т-активина способны через 1.5 ч экспрессировать рецепторы к аутоэритроцитам. Пре-Т-клетки содержатся среди нулевых лимфоцитов, их дифференцировка в ауто- РОК происходит в результате контакта с Т-клетками и под влиянием Т-активина в течение более продолжительного срока (6 ч) [3|. Мононуклеарные ■ клетки (МНК) выделяли центрифугированием гепаринизированной венозной периферической крови в градиенте плотности фиколла-веротрафина. Определение ауто-РОК проводили стандартным методом [3]. Количество преауто-РОК определяли по приросту ауто-РОК за 1,5 ч инкубации МНК с Т-акгивином (1 мкг/мл. предприятие “Биомед”). Прирост ауто-РОК рассчитывали как разность между процентным содержанием ауто-РОК в 1.5-часо- вых и свежевыделеиных культурах. Количество пре-Т-лимфо- цитов определяли как разность между количеством ауто-РОК в 6-часовых и свежевыделенных культурах МНК.

Статистическую обработку проводили, используя методы вариационной статистики. Сравнение вариационных рядов осуществляли с помощью непараметрического Т-парного критерия Вилкоксона.

Результаты и их обсуждение

Кривые динамики процентного содержания ауто-РОК в процессе инкубации МНК больных СД и доноров в присутствии Т-активина представлены на рисунке. Как видно, инкубация

Кривые процентного содержания ауто-РОК у бальных СД I и II типов (1) и доноров (2).

По оси ординат - количество ауто-РОК (в %); по оси абсцисс - продолжительность культивирования МНК с T-активином (в ч).

МНК с Т-активином сопровождается у больных СД и у доноров двумя выраженными подъемами количества ауто-РОК через 1,5 и б ч культивирования. При этом количество ауто-РОК, определяемых у больных СД и у доноров через разное время, за исключением б ч инкубации с Т-акти- вином, не имеет различий. Иными словами, посттимическая дифференцировка Т-лимфоцитов у больных СД отличается от дифференцировки у доноров только на этапе пре-Т-лимфоцитов. Полученные результаты свидетельствуют о том, что наибольшее значение в развитии нарушений клеточного звена иммунной системы при СД имеют пре-Т-лимфоциты.

Далее было проанализировано количество Т- прекурсорных лимфоцитов у больных с разными клиническими формами СД. Необходимость этого обусловлена различием иммунологических нарушений, описанных в литературе у больных СД I и II типов [1]. Результаты представлены в табл. 1.

Как видно из табл. 1, количество ауто-РОК и преауто-РОК при разных формах СД не отличается от показателей у доноров, а количество пре- Т-лимфоцитов достоверно снижено только у больных СД I типа. Следует отметить, что в литературе только СД I типа рассматривается как аутоиммунное заболевание [1, 5], в патогенезе которого большое место принадлежит иммунологическим нарушениям, преимущественно системы Т-лимфоцитов и моноцитов. Иммунологические нарушения при СД II типа рассматриваются как второстепенные [1]. Нами показано, что независимо от генеза и особенностей течения СД II типа (неинсулинопотребный, инсулинопотребный, панкреатогенный) количество пре-Т-лимфоцитов не отличается от такового у здоровых людей.

Известно, что изменения иммунологических показателей более выражены у больных в состоянии кетоацидоза [7|.

Возможно, причиной этого является нарушение дифференцировки Т-лимфоцитов. В наших экспериментах установлено, что количество пре- Т-лимфоцитов наиболее снижено у больных в состоянии кетоацидоза (табл. 2).

На настоящем этапе исследования в связи с малочисленностью групп больных СД затруднительно оценить полученные изменения в иммунном статусе в зависимости от длительности СД, особенностей клинической картины, частоты кетоацидоза в анамнезе, особенностей традицион-

Таблица I

Количество Т-прскурс'оров у больных СД и доноров

Примечание. Здесь и в табл."2 звездочкой отмечены показатели, достоверно (р < 0.01) отличающиеся от показателей у доноров.

Таблица 2

Количество прс-Т-клсток у больных СД I типа в разные фазы компенсации

ной сахаропонижающей терапии и некоторых других факторов. Актуальным является и вопрос прогнозирования развития заболевания. В настоящее время идентифицированы различные аутоантитела, значительно чаше встречающиеся при наследственной предрасположенности к СД I типа и позволяющие предсказать возникновение заболевания. Наиболее информативными считают антитела к цитоплазме островковых клеток, а также белку с мол. м. 64 килодальтона (глутаматдекарбоксилазе). Иммунологические нарушения при СД I типа возникают задолго до клинических проявлений, и не исключено, что прекур- сорные Т-лимфоциты подвергаются изменениям раньше, чем зрелые лимфоциты. Разработка этих положений, как и перспектив иммуномодулирующего лечения, является задачей дальнейших исследований.

В ы в о д ы