Preview

Проблемы Эндокринологии

Расширенный поиск

Инсулинсвязывающая активность иммунокомпетентных клеток у детей с сахарным диабетом

https://doi.org/10.14341/probl19974319-11

Содержание

Перейти к:

Аннотация

Инсулинсвязывающая активность (ИБК) мононуклеаров периферической крови и Т-лимфоцитов изучалась у детей с сахарным диабетом I типа различной длительности и с различной степенью компенсации. Увеличение количества неядерного IBA наблюдалось во время фазы компенсации у пациентов с начальным диабетом и снижение связывания рецептора инсулина с помощью мононуклеаров у пациентов с затяжным заболеванием. Изменения в IBA T-лимфоцитов и мононуклеаров были одинаковыми при исходном диабете и противоположны при длительном заболевании: увеличение мононуклеарного IBA и заметное снижение T-клеточного IBA во время декомпенсации и уменьшение мононуклеарного IBA и снижение связывания гормонов Т-клетками во время компенсации. При исходном диабете IBA мононуклеаров был самым низким у детей с кетоацидотической комой и кетоацидозом, а при затяжном течении заболевания без кетоза они были самыми низкими у пациентов, нуждающихся в интенсивной терапии инсулином с повышенными дозами гормона. Эти данные о состоянии рецепторов лимфоцитов у диабетиков с заболеванием типа 1 будут полезны для оценки тяжести заболевания и для разработки дифференцированных подходов к адекватной терапии инсулином.

Для цитирования:


Жумагалиева Г.Д., Скрябина Э.Г., Смирнов В.В., Микаелян Н.П., Петракова К.В., Князев Ю.А., Чередеев А.Н. Инсулинсвязывающая активность иммунокомпетентных клеток у детей с сахарным диабетом. Проблемы Эндокринологии. 1997;43(1):9-11. https://doi.org/10.14341/probl19974319-11

For citation:


Zhumagaliyeva G.D., Skryabina E.G., Smirnov V.V., Mikaelyan N.P., Petrakova К.V., Knyazev Yu.A., Cheredeyev A.N. Insulin-binding activity of immunocompetent cells in children with diabetes mellitus. Problems of Endocrinology. 1997;43(1):9-11. (In Russ.) https://doi.org/10.14341/probl19974319-11

Инсулин как природный ростовой фактор регулирует участие Т-лимфоцитов в клеточно-опосредованных реакциях [И, 12]. Влияние гормона на иммунокомпетентные клетки (ИКК) реализуется через мембранные рецепторы к инсулину (ИР). ИР определяется на нейтрофилах, эритроцитах, моноцитах, культивируемых фибробластах, активированных Т- и В-лимфоцитах и других инсулинчувствительных клетках человека и животных [7, 11]. До сих пор дискутируется вопрос о существовании ИР на покоящихся Т-клетках [9, 12]. Считают, что покоящиеся Т-лимфоциты лишены ИР [16] или плотность их настолько низкая, что находится за пределами чувствительности существующих методов идентификации. Антигенная или митогенная стимуляция приводит к появлению ИР, что может отражать процесс дифференцировки клетки и свидетельствовать о приобретении компетентности для ответа на стимулы, специфичные для этих рецепторов [6, 7, 13].

Экспрессия и функциональная полноценность ИР зависят от многих факторов, в том числе и от концентрации инсулина крови. Дефекты состояния ИР могут обусловливать нарушения эффекторных и иммунорегуляторных свойств ИКК и иметь патогенетическое значение при сахарном диабете (СД) [18].

В связи с особой значимостью состояния ИР на инсулинчувствительных ИКК при СД наибольший интерес представляет исследование ин- сулинрецепторного связывания гормона мононук- леарными клетками (МНК) и Т-лимфоцитами.

Материалы и методы

В задачи нашего исследования входило изучение инсулин- связывающей активности (ИСА) ИР МНК и Т-лимфоцитов крови детей с сахарным диабетом I типа в зависимости от длительности и состояния компенсации заболевания.

Объектом исследования служили клетки периферической крови детей (п = 31) в возрасте 7—14 лет, больных СД, находившихся в эндокринологическом отделении детской клинической больницы № 1 Москвы.

Обследованные однократно дети были разделены на 2 группы: 1-я — 15 детей с начальным диабетом (длительность до 12 мес) и 2-я — 16 детей с длительно текущим СД (от 1 года до 10 лет).

При госпитализации в стационар 3 ребенка с начальным СД были в состоянии кетоацидотической комы, 17 больных поступили в фазе декомпенсации, из них 10 с длительно текущим процессом; в декомпенсации без кетоацидоза было 11 детей.

В связи со значительной ролью углеводного обмена в функции ИКК мы сочли целесообразным разделить каждую группу обследованных на подгруппы декомпенсированных (1а, 2а) и компенсированных (16, 26) больных в зависимости от степени компенсации заболевания.

Показатели гликемии у декомпенсированных больных обеих обследованных групп были в пределах 10,2—23,5 мМ/л, в то время как уровень глюкозурии у детей с начальным СД варьировал в пределах до 82 г/сут, а у длительно болеющих — до 42,9 г/сут. При компенсации СД показатели углеводного обмена у больных соответствовали принятым критериям компенсации независимо от длительности заболевания.

На фоне комплексного патогенетического и симптоматического лечения проводили инсулинотерапию человеческим инсулином Actrapid и Protaphan фирмы "Novo". Суточная потребность в экзогенном инсулине составляла при декомпенсации заболевания у больных с начальным СД 1 типа 0,23—1,2 ЕД на 1 кг массы ребенка, с длительно текущим диабетом 0,73—1,1 ЕД/кг, а при компенсации у детей с начальным СД I типа 0,05—0,48 ЕД/кг, у длительно болеющих 0,2—1,1 ЕД/кг.

Группу сравнения составили 10 здоровых детей. МНК выделяли из периферической крови методом центрифугирования в градиенте плотности фиколла—верографина по A. Boyurn [5]. Т-обогащенную фракцию лимфоцитов получали выделением Е-розеткообразующих клеток (Е-РОК) при повторном центрифугировании в градиенте плотности фиколла—верографина; для реакции розеткообразования использовали эритроциты барана, обработанные нейраминидазой.

ИР ИКК изучали in vitro по инсулинсвязывающей способности МНК и Т-лимфоцитов радиоиммунным методом конкурентного вытеснения радиоактивного инсулина возрастающими концентрациями немеченого гормона [14].

ИСА, выраженную в процентах, рассчитывали по формуле

ИСА =             • 100;

А

где А — общее связывание (в имп/мин/кл.), Б — неспецифическое связывание в присутствии немеченого гормона в дозе 100 имп/мин/кл.).

Полученные результаты обработаны методом вариационной статистики с применением критерия Стьюдента—Фишера.

ИСА МНК и Т-лимфоцитов крови детей с СД I типа

Группа

обследованных

ИСА

МНК

Т-лимфоциты

Здоровые (я = 10)

21,43 ± 3,91

-

1-я (и = 15)

28,85 ± 4,08*

20,99 ± 3,91

подгруппа 1а

25,94 ± 5,07

16,62 ± 4,29

подгруппа 16

33,95 ± 4,97*

31,20 ± 4,10

2-я (и = 16)

23,03 ± 4,22

19,70 ± 5,69

подгруппа 2а

25,68 ± 5,08

12,45 ± 5,56

подгруппа 26

17,73 ± 4,09*

37,85 ± 4,67

Примечание. Звездочки — достоверность различий: одна — с группой здоровых детей (р < 0,05), две — с подгруппой 16 (р < 0,01).

Результаты и их обсуждение

ИСА МНК у здоровых детей составляла 21,43 ± 3,91% и варьировала в пределах 15,3— 30,2%. Средние значения ПСА МНК в целом по группам обследованных больных составляли 28,85 ± 4,08% при начальном и 23,03 ± 4,22% при длительно текущем диабете (см. таблицу).

Если по средним значениям ИСА не обнаружено существенных различий, зависящих от длительности заболевания, то в зависимости от степени компенсации выявлены отчетливые различия: в подгруппе 16 — повышение ИСА (33,95 ± 4,96%; р < 0,05 по сравнению со здоровыми детьми), в подгруппе 26 — снижение ИСА (17,73 ± 4,09%; р < 0,01 по сравнению с подгруппой 16). При декомпенсации заболевания по средним значениям ИСА не выявлено различий между подгруппами 1а (25,94 ± 5,07%) и 2а (25,68 ± 5,08%).

ИСА Т-лимфоцитов крови здоровых детей не выявлена (см. таблицу), что согласуется с мнением об отсутствии или низкой плотности ИР на покоящихся Т-клетках в отличие от активированных Т-лимфоцитов [3, 16].

При СД вследствие активации ИКК, в том числе Т-клеток [2, 3, 8], Т-лимфоциты больных обладали ИСА, и средние значения (1-я группа — 20,99 ± 3,91%; 2-я — 19,70 ± 5,69%) в целом по группам практически не отличались от ИСА МНК здоровых детей (21,43 ± 3,91%). По сравнению с МНК на Т-фракции лимфоцитов получены другие закономерности изменения ИСА. Если характер изменений ИСА Т-клеток при начальном диабете был однотипен, то при длительно текущем — противоположен изменениям ИСА МНК: в подгруппе 2а на фоне некоторого повышения ИСА МНК (25,68 ± 5,08%) обнаружено значительное снижение активности ИР на Т-клетках (12,45 ± 5,56%). Напротив, в подгруппе 26 отмечена сниженная на МНК (17,73 ± 4,09%) и резко повышенная на Т-фракции лимфоцитов ИСА (37,85 ± 4,6%), что можно объяснить снижением ИСА моноцитов и В-лимфоцитов.

В связи с широкими пределами колебаний индивидуальных значений ИСА МНК и Т-лимфо- цитов (рис. 1, 2) представляет интерес анализ активности ИР в зависимости от клинико-метаболического состояния больного и длительности заболевания. У декомпенсированных больных обеих групп наиболее низкая активность ИР как МНК, так и Т-лимфоцитов (до 10%) обнаружена при начальном диабете только у детей, поступивших в состоянии кетоацидотической комы и декомпенсации с кетоацидозом, а при длительно текущем СД — и у детей при декомпенсации без кетоза. Этим больным также была необходима интенсифицированная инсулинотерапия, как правило, с увеличением доз вводимого гормона. Снижение ИСА может быть признаком развития инсулино- резистентности [1].

Наиболее высокая активность ИР Т-лимфоцитов (1-я группа — 30—41%, 2-я группа — 37— 61%) была характерна для компенсированных больных обеих групп, поступивших преимущественно в состоянии декомпенсации с кетоацидозом. У этих же больных клинико-метаболическая компенсация была достигнута при последовательном снижении доз получаемого инсулина.

Рис. 1 ИСА МНК крови детей с СД I типа.

Здесь и на рис. 2; 7 — группа больных с начальным СД I типа; 2 — группа больных с длительно текущим СД I типа; 1а, 2а — подгруппы декомпенсированных больных; 16, 26 — подгруппы компенсированных больных; К — группа здоровых детей. Кружки и треугольники — число наблюдений.

Таким образом, высокая вариабельность индивидуальных значений ИСА МНК и Т-лимфоцитов, возможно, связана как с гетерогенностью обследованный больных, так и с многообразием дефектов ИР у клинически однородной группы.

Известно, что разные популяции ИКК обладают различной ИСА ИР, которая зависит как от количества клеток, имеющих ИР, так и от изменения авидности и аффинности рецепторов [17] и их киназной активности [10]. Кроме того, нельзя исключить блокирующего действия избытка инсулина, инсулиноподобных ростовых факторов [15, 19] и специфических антирецепторных антител [4], а также перекрестного связывания ИР с антигенами HLA-системы [20]. Одно звено или совокупность нескольких повреждающих звеньев регуляции экспрессии ИР на ИКК наряду с гетерогенностью количественных параметров популяций и субпопуляций Т-лимфоцитов при СД могут обусловливать нарушения как экспрессии, так и функционирования самих рецепторов с последующим изменением эффекторных и иммуно- регуляторных свойств клеток. В то же время снижение действия описанных выше факторов при метаболической компенсации наряду с увеличением количества Т-лимфоцитов могут объяснять наблюдаемое нами повышение ИСА фракции Т- лимфоцитов. Состояние ИР при СД важно не только для диагностики уровня и степени нарушений рецепторного аппарата ИКК, но и для дифференцированного подхода к адекватной ин- сулинокоррекции.

Выводы

  1. Т-лимфоциты детей с СД I типа в отличие от клеток здоровых обладают выраженной ИСА, уровень которой значительно выше в фазе компенсации независимо от длительности заболевания.
  2. Выявленные различия в характере и степени изменения ИСА МНК и Т-лимфоцитов в зависимости от клинико-метаболического состояния и длительности заболевания свидетельствуют о глубине нарушений рецепторного аппарата ИКК при СД I типа.

Список литературы

1. Вахрушева Л. Л., Микаелян Н. П., Князев Ю. А., Сергеева Н. А. И Педиатрия. - 1989. — № И. — С. 16—18.

2. Alviggi L., Hoskins Р. J., Pike D. A. et al. // Lancet. — 1984,— Vol. 2 - P. 4-6.

3. Bach J. F. /I Endocrinol. Rev. — 1994. — Vol. 15, N 4. — P. 516-542.

4. Batersch H, Thompson R. A., Odugbesan O., Barnett A. H. // Clin. exp. Immunol. — 1983. — Vol. 71, N 1. — P. 185—190.

5. Boyum A. // Scand. J. Clin. Lab. Invest. — 1968. — Suppl. 97. P. 77-82.

6. Buffington С. K, El-ShiekhT., Kitabchi A. E., Matteri R. // Bi- ochem. Biophys. Res. Commun. — 1986. — Vol. 134, N 1. — P. 412-419.

7. Capesn J., Magre J., Reynet C. et al. // Ann. Med. interne. — 1990. - Vol. 141, N 2. - P. 145-155.

8. De Berardinis P. et al. // Clin. Immunol. Irnmunopathol. — 1993- Vol. 73, N 3. - P. 362-366.

9. Delovitch T. L., Phillips M. L., Naquet P. et al. // Progress in Immunol. 6-th International Congress of Immunology. — Orlando, 1986. -Vol. 1. - P. 238 - 254.

10. Haring H, Obermaier B., Ermel B. et al. // Diabet. Metab. — 1987. - Vol. 13, N 3 bis. - P. 284-285.

11. Helderman J. H, Strom T. B. // Nature. - 1978. - Vol. 274. P. 62-63.

12. Helderman J. H, Auso K., Rosenstock J., Raskin P. // J. clin. Invest. - 1987. - Vol. 79, N 2. - P. 566-571.

13. Kahn C. R., White M. F. // Ibid. - 1988. - Vol. 82. - P. 1151-1156.

14. Kasuga M., Karlsson F. A., Kahn C. R. // Science. — 1982. — Vol. 215. - P. 185 - 107.

15. Kozak R. W., Haskell., Greenstein L. A. et al. // Cell Immunol. 1987. - Vol. 109, N 2. - P. 318-331.

16. Kumagai J. I., Akijama H, Iwashita S. et al. // J. Immunol. — Vol. 125, N 4. - P. 1249-1254.

17. Olefsky J. M., Reaven J. M. // J. clin. Invest. — 1974. — Vol. 54. - P. 1323.

18. Roep В. O., De Vries R. R. P. // Eur. J. clin. Invest. — 1992. Vol. 22, N 11. - P. 697-711.

19. Roth J., Neville D. M., Kahn C. R., Jordon P. // N. Engl. J. Med. - 1977. - Vol. 226 - P. 227.

20. Samson M., Cousin J. L., Fhimann K. // J. Immunol. — 1986. Vol. 13, N 7. - P. 2293-2298.


Об авторах

Г. Д. Жумагалиева

Российский государственный медицинский университет


Россия


Э. Г. Скрябина

Российский государственный медицинский университет


Россия


В. В. Смирнов

Российский государственный медицинский университет


Россия


Н. П. Микаелян

Российский государственный медицинский университет


Россия


К. В. Петракова

Российский государственный медицинский университет


Россия


Ю. А. Князев

Российский государственный медицинский университет


Россия


А. Н. Чередеев

Российский государственный медицинский университет


Россия


Рецензия

Для цитирования:


Жумагалиева Г.Д., Скрябина Э.Г., Смирнов В.В., Микаелян Н.П., Петракова К.В., Князев Ю.А., Чередеев А.Н. Инсулинсвязывающая активность иммунокомпетентных клеток у детей с сахарным диабетом. Проблемы Эндокринологии. 1997;43(1):9-11. https://doi.org/10.14341/probl19974319-11

For citation:


Zhumagaliyeva G.D., Skryabina E.G., Smirnov V.V., Mikaelyan N.P., Petrakova К.V., Knyazev Yu.A., Cheredeyev A.N. Insulin-binding activity of immunocompetent cells in children with diabetes mellitus. Problems of Endocrinology. 1997;43(1):9-11. (In Russ.) https://doi.org/10.14341/probl19974319-11

Просмотров: 166


ISSN 0375-9660 (Print)
ISSN 2308-1430 (Online)