Рецепторы стероидных гормонов и их роль в развитии гипофизарных опухолей

Процесс рецепции внеклеточных регуляторов занимает особое место в сложной системе механиз­мов биологического узнавания. По современным представлениям, гормоны оказывают свое регули­рующее действие на компетентные клетки благода­ря наличию в составе последних особых рецептор­ных белков, выполняющих 2 функции: дискрими­нированного приема поступающего сигнала и ини­циации соответствующих ответов клетки [7].

Известно 2 типа рецепторов, различающихся по своей локализации: рецепторы полипептидных гормонов, простагландинов и нейромедиаторов фиксированы на плазматической мембране, что определяет необходимость участия в их действии внутриклеточных посредников — цАМФ, Са²⁺, цГМФ; рецепторы стероидных гормонов, а также гормонов щитовидной железы локализованы внут­риклеточно, в связи с чем гормон-рецепторные комплексы могут принимать непосредственное участие в контроле активности определенных генов (на уровне клеточного ядра). Благодаря этому воз­никают особое разнообразие и разнонаправлен- ность индуцируемых ими эффектов в клетках раз­ных тканей, т. е. имеет место селективность гормо­нального действия [7].

Стероидные гормоны контролируют широкий спектр физиологических процессов в организме. Степень их влияния на клетку определяется сле­дующими условиями: наличием специфических внутриклеточных рецепторов для связи гормона; достаточно высоким содержанием стероидных гор­монов для связи с рецептором; в геноме клетки должен быть гормонрецептивный ген, который осуществляет регуляцию развития гормон-рецеп- торного комплекса. Когда этот комплекс образует­ся, он транслоцируется в ядро клетки. Активиро­ванный комплекс взаимодействует с ядерным хро­матином, стимулируя синтез белка и деление кле­ток [51].

Такая биологическая последовательность явля­ется важным фактором в диагностике и лечении гормонально-зависимых опухолей. Например, при исследовании опухоли молочных желез была уста­новлена четкая корреляция между количеством ре­цепторов и ответом на гормональное воздействие, приводящее к возникновению опухоли [48, 59].

Эстрогены как стероидные гормоны оказывают влияние на различные гипофизарные функции, включая регуляцию синтеза и секреции многих тропных гормонов, в частности пролактина и гона­дотропинов, а также пролиферацию некоторых ти­пов гипофизарных клеток. Изучение большинства биологических эффектов проведено на изолиро­ванных гипофизарных клетках, а также на клетках опухолей гипофиза. Влияние эстрогенов осущест­вляется через эстрогенные рецепторы (ЭР) в ядре клетки. Рецепторы действуют как димер, модули­руя транскрипцию гена, и содержат специфиче­ские функциональные домены, закодированные в различных экзонах.

Показана роль эстрогенов в медиации позитив­ных или негативных влияний на экспрессию генов в [3-субъединице ФСГ и ЛГ и на секрецию гонадо­тропинов [58].

Имеются доказательства непосредственного взаимодействия классических рецепторов эстроге­нов с участками гена [3-субъединицы Л Г [64]. Кли­нические наблюдения подтверждают эту концеп­цию, особенно при таких патологиях, как пролак­тиномы гипофиза у женщин и гонадотропинпроду- цирующие опухоли у мужчин [67].

Существует 2 типа ЭР: ЭР-а и ЭР-р, которые экспрессируются в различных тканях и типах кле­ток. ЭР состоят из доменов, которые имеют связь с центральной ДНК. С-терминали гормонсвязываю- щей области стимулируют транскрипцию гена, ло­кализованного как на N-, так и на С-терминальных областях [52].

Кроме того, обнаружены другие изоформы ЭР в некоторых тканях и показана их роль в генезе опу­холей или в модуляции ответов на эстрогены [64]. В исследованиях М. Shupnik и соавт. [64] показано, что чистые пролактиномы содержат ЭР-ос и частич­но ЭР-р. В опухолях, экспрессирующих пролактин и гормон роста, чаще выявляются ЭР-р. Аналогич­ные результаты наблюдали и в "молчащих" опухо­лях гипофиза, а также в опухолях, синтезирующих гонадотропины. Экспрессию двух форм рецепто­ров в опухолях наблюдали значительно чаще, чем одной из них. Как правило, интактные гипофизы содержат модифицированные ЭР-а с отсутствием экзонов в положениях 4, 5 и 7. Очень редко отсут­ствует экзон в положении 2. Сочетанные варианты мРНК ЭР-а были отмечены среди различных ти­пов опухолей. Большая часть ЭР-позитивных про­лактином экспрессирует ЭР-а варианты с потерей экзонов 2, 4 или 5, тогда как опухоли, секретирую­щие гонадотропины, экспрессируют по большей части вариант ЭР-а с потерей экзона 7. Вариант мРНК ЭР-а, связанный с экзоном 2, наблюдали в большинстве всех ЭР-0-позитивных опухолей.

Иммуноблоттинг белков ЭР-а и ЭР-₽ подтвер­ждает результаты определения специфических мРНК. Поскольку ЭР-а и ЭР-р по-разному реаги­руют на различные модуляторы экспрессии ЭР, стертые формы эстрадиолрецептивности имеют биологические ответы, отличающиеся от ответов опухолей с полноценным набором рецептивности. Экспрессия этих изоформ может оказывать влия­ние на биологические свойства опухолей и опреде­лять специфичность реакции на эстрогенную или антиэстрогенную терапию.

С помощью различных методических подходов при изучении клеток различных аденом гипофиза было показано, что самый высокий уровень ком­плекса мРНК ЭР-а и рецепторного белка характе­рен для пролактином, тогда как в опухолях, выра­батывающих гонадотропины, их концентрация бы­ла значительно меньше [31, 33]. "Молчащие" опу­холи, содержащие ЭР-а, встречались менее часто, а опухоли, секретирующие гормон роста, не содер­жали этих рецепторов. Эти результаты согласуются с данными, полученными на интактных гипофи­зарных клетках и свидетельствующими о том, что большая часть клеток, секретирующих пролактин и гонадотропины, имеет ЭР-а, а клетки, секрети­рующие гормон роста, их не содержат [24, 81, 82]. Эти исследования не могут объяснить включения радиоактивного эстрадиола в соматотрофы и их влияния на секрецию гормона роста, описанные некоторыми исследователями [25, 55]. Более совре­менные методы исследования (изоэлектрическое фокусирование и гибридизация in situ) очень редко выявляют эстрадиол в соматотрофах и ЭР-а-пози- тивных клетках. Идентифицирование различных рецепторов эстрадиола, вырабатываемых в гормон­чувствительных тканях, таких как опухоли молоч­ных желез, весьма сложно.

Выключение отдельных экзонов путем альтер­нативного сплайсинга может оказывать стимули­рующее влияние на рецепторную функцию и вли­ять на способность эстрогенного рецептора прояв­лять биологический эффект. Например, элимина­ция экзона 5 ЭР-а вызывает в оставшемся белке потерю многих гормонсвязывающих. В раковых клетках молочной железы это может влиять на рост клеток или возникновение антиэстрогенных устой­чивых клеток [27, 76]. Другой вариант — потеря части DNA-связывающего домена в экзоне 3 (ЭР- аЗ) или активация области в С-терминалях (ЭР-а7) — оказывает преимущественно негативное влия­ние на действие рецептора в отношении транс­крипции генов [17, 28]. Последние данные показы­вают, что устранение экзона 2 (вариант ЭР-а2) мо­жет усилить способность рецептора стимулировать транскрипцию генов. Дополнительные изоформы ЭР, вызываемые ЭР-р, были клонированы из пред­стательной железы грызунов и человека, и мРНК этих белков была идентифицирована в некоторых тканях, включая гипофиз [43]. Физиологические лиганды взаимодействуют с ЭР-р так же, как с ЭР- а, но эти изоформы по-разному связываются и влияют на транскрипцию генов и по-разному реа­гируют на специфические антиэстрогены, отдель­ные эстрогенрецепторные модуляторы и сходные эстрогены [27, 75, 76]. Эти данные предполагают, что экспрессия ЭР-р-изоформ может влиять на от­вет специфических клеток или опухолей при воз­действии сходных соединений, применяемых в клинике.

Данные М. Shupnik [63, 64] показали, что экс­прессия мРНК изоформ ЭР и в той же степени со­единение различных изоформ между собой возни­кает преимущественно в специфических типах ги­пофизарных клеток. Экспрессию мРНК ЭР наблю­дали во всех пролактиномах, в большинстве гона­дотропных опухолей, некоторых "молчащих" опу­холях, но не в опухолях, секретирующих гормон роста. Эти данные согласуются с результатами дру­гих исследователей, которые иными методами (в основном иммуногистохимическими) выявили в опухолях гипофиза экспрессию ЭР-а в лактотроп- ных и гонадотропных клетках. Используя метод гибридизации in situ, L. Stefaneanu и соавт. [69—72] показали, что почти все типы клеток содержат мРНК ЭР.

Показано, что мРНК ЭР-а локализована в боль­ших количествах в пролактиномах по сравнению с гонадотропиномами или "молчащими" опухолями и что экспрессия этого белка отражает количество интактных гипофизарных клеток, вырабатываю­щих ЭР-а-белок [24, 25, 39].

Ткань интактного гипофиза содержит те же ва­рианты мРНК ЭР-а, что и гипофизарные опухоли, хотя в опухолевых тканях, особенно в пролактино­мах, потеря экзона 2 встречается намного чаще. Поскольку лактотрофы представляют большую часть клеток интактных гипофизов, наиболее веро­ятно, что эти различия отражают повышенную экс­прессию в опухолевой ткани чаще, чем экспрессию в незначительной популяции клеток [38]. Нет со­мнения в том, что потеря экзона мРНК наблюда­ется и в нормальных, и в опухолевых клетках. От­мечена спаренная потеря экзона 3/4 и 5/6 в гипо­физах крыс.

Различные иммунопозитивные формы белка ЭР-а экспрессируются в нормальных и опухолевых тканях гипофиза, и эти белки могут модулировать физиологические ответы на эстрогены в клетках. Недостаточна информация о потенциальной роли таких ЭР-белков в гипофизе человека, но имеется много данных о них, полученных на опухолевых клетках молочных желез и трансформируемых кле­точных линиях опухолей. Ввиду того что рецептор имеет доменную структуру, потеря мРНК в белках ЭР вызывает нестандартные функции. Потеря эк­зона 4 устраняет часть ДНК, ответственную за спе­цифическое связывание в гормоночувствительных областях и приводит к значительной потере биоло­гической активности или влияет на активность связывания неизмененного рецептора с эстрогена­ми. Эти изменения, экспрессируемые в различных тканях, могут и не оказывать влияния на эстроген­ную активность. Белок ЭР-а7 может связываться с ЭР-Es на ДНК, но не может связывать гормон, тем самым блокируется функция цельного рецептора [27].

Наоборот, мРНК ЭР-а5, пересаженный в усе­ченный белок, который связывает ДНК, не может связывать эстрогены и постоянно оказывает гор- моннезависимое влияние на эстрогенрегулируе- мую транскрипцию гена [18, 27]. мРНК и белок об­наружены в раковых клетках молочных желез и клеточных линиях опухолей и выявлено гормонне- зависимое ЭР-опосредованное влияние на рост и экспрессию гена [40]. Вариант ЭР-а5 экспрессиру­ется в значительной степени в некоторых ЭР-нега- тивных, прогестеронрецепторных опухолях. Вари­анты экспрессии можно объяснить фенотипом, при котором различные белки могут связываться с ЭР-Es и активировать рецепторы прогестерона без эстрогенов, т. е. создается возможность потери чувствительности к эстрогенам и антиэстрогенам [46].

В последних исследованиях [36] описано, когда вариант ЭР-а2 с ДНК, пересаженный в клетки ос­теосаркомы человека, имел низкую активность, но усиливал способность ЭР-а стимулировать c-fos- reporter-экспрессию гена. Механизмы этого эф­фекта неизвестны, так как этот белок не связывал­ся с ДНК или с гормоном. Сложно переносить ре­зультаты, полученные на клеточных линиях опухо­лей, на гипофизарную ткань, в частности клеточ­но-специфические эффекты белков эстрадиоловых рецепторов и их изоформы на различные промото­ры [50, 75]. Однако интересно, что постоянно ак­тивная форма ЭР-а5 или стимулирующаяся эстра­диолом ЭР-а2-форма рецепторов главным образом экспрессируются в пролактиномах, тогда как инги­бирующая форма ЭР7 главным образом экспресси­руется в гонадотропных опухолях.

мРНК ЭР-р2-вариант экспрессировался в нор­мальных гипофизах и в многих типах опухолей, а также в укороченных белках, состоящих из 1 экзо­на. Биологическую активность этих белков, если она вообще имелась, трудно предсказать, но она могла соответствовать стимуляторной активности, описанной для варианта ЭР-а2. Некоторые вари­анты сплайсинга мРНК ЭР-р были охарактеризо­ваны в тканях крыс, включая гипофиз [54, 78]. Один из них связан с потерей экзона 3 и тем самым может связывать DNA и вариант ЭР-р2, который включает в себя 18 аминокислот между экзонами 5 и 6, изменяет в белке эстрогенсвязывающую спо­собность [18, 54].

Ряд исследователей предполагают, что в гипо­физах крыс ЭР-а экспрессируются в большей сте­пени, чем ЭР-р [43, 54]. Данные о том, что гонадо- трофы составляют малую часть гипофизарных кле­ток, могут объяснить низкую общую экспрессию ЭР-р.

Многие клетки экспрессируют обе изоформы ЭР, а поскольку ЭР-р и ЭР-а могут образовывать гетеродимер, то оба белка могут оказывать влияние на действие эстрогенов в этих клетках.

Таким образом, ЭР-р является основным ме­диатором действия эстрогенов в гонадотропиномах и этим можно объяснять некоторые косвенные действия эстрогенов на секрецию гормона роста. Ввиду того что 2 изоформы ЭР имеют различную связывающую способность для естественных и синтетических эстрогенов [26], различная или экс­клюзивная экспрессия белков в различных типах клеток может иметь физиологическое или терапев­тическое значение.

Нейроэпителиальные опухоли (анапластическая астроцитома и глиобластома) также формируются за счет экспрессии рецепторов стероидных гормо­нов [28, 41, 46, 56, 57, 77, 80]. В работе Р. Paoletti и соавт. [51] было доказано наличие рецепторов к эс­трогенам, андрогенам, прогестерону и глюкокор­тикоидам в нейроэпителиальных опухолях.

Показана четкая связь между наличием глюко­кортикоидных и андрогенных рецепторов и степе­нью аплазии клеток [12, 14, 26].

Глюкокортикоидные рецепторы, наиболее час­то обнаруживаемые в астроцитомах, проявляли большую андрогенную рецептивность по сравне­нию с рецепторами, локализованными в астроци­томах. Контрольные опыты с белым веществом мозга не показали наличия специфической стероид- связывающей активности. Отмечено, что специфи­ческий андрогенсвязывающий белок чаще встреча­ется у самок, чем у самцов [73].

Важным моментом в аналогичного рода иссле­дованиях является выяснение роли рецепторов в модуляции роста клеток, т. е. могут ли андроген­ные и глюкокортикоидные гормоны оказывать влияние на этот процесс. Хорошо известно дейст­вие дексаметазона на рост культуральной нейро­эпителиальной опухоли, но без всякой связи между модуляцией роста и наличием специфических ре­цепторов [30, 32]. Более того, использование высо­ких доз кортикостероидов (метилпреднизолона) после удаления опухоли и радиотерапии было не­эффективным даже при сочетании с химиотерапи­ей (l,3-bis(2-chloroethyl)-l-nitrosourea) [32].

Есть предположение о том, что торможение рос­та клеток происходит при одновременном приме­нении высоких доз андрогенов и глюкокортикоид­ных гормонов. Этот факт, по всей видимости, не связан с рецепторной медиацией, а связан с други­ми механизмами, например с изменениями в кле­точной мембране, как было показано в исследова­ниях G. Sica [65]. Низкие дозы дексаметазона сти­мулировали рост только глюкокортикоидно-пози­тивных опухолей, и эта стимуляция, по-видимому, была обязана наличию специфических рецепторов.

Отсутствие у этих гормонов способности акти­вировать глюкозокортикоидную рецепцию можно объяснить в значительной степени тем, что, как и в случае с опухолью молочных желез, наличие ре­цепторов является необходимым, но, вероятно, не­достаточным фактором для модуляции роста. Важ­ность наличия специфических рецепторов для мо­дуляции роста подчеркивается отсутствием ответа в глюкокортикоидно-негативных случаях. Такое предположение подтверждается исследованиями с использованием тестостерона. Малые дозы этого гормона неэффективны во всех андрогенрецептор- ных негативных случаях. Эти исследования лиш­ний раз показывают, что дексаметазон и тестосте­рон проявляют свое влияние на развитие культи­вируемых нейроэпителиальных опухолей при на­личии специфических рецепторов. Изучение ре­цепции стероидных гормонов и реактивности к ним существенно расширяет наши представления о механизмах программирования и регуляции жиз­недеятельности клеток в норме и при патологии.

Концентрация ядерных рецепторов эстрадиола (а) и тестосте­рона (б) в опухолевых тканях.

По осям ординат — концентрация ядерных рецепторов (в фмоль/мг ДНК), по осям абсцисс — структура опухолевой ткани.

1 — пролактинсекретирующая аденома гипофиза (л = 17); 2 — менингиома (л = 9);

3 — астроцитома (л = 3); 4 — невринома (л = 3); 5 — секрет эпендимомы (л = 1); 6 — соматотропинома (л = 2).

* — р < 0,05; ** — р < 0,001 по сравнению с 1.

Это в полной мере относится к механизму возник­новения аденом гипофиза.

Гормональная активность аденом гипофиза за­висит от функционального состояния высших от­делов ЦНС, а также от того гормонального фона, чаще гормонального дисбаланса, который возни­кает при различных патологиях.

В настоящее время считается устоявшимся по­ложение, что процесс образования аденом прохо­дит в 2 фазы: первая включает в себя появление в клетках гипофиза специальных или индуцирован­ных мутаций; вторая — эндогенные и экзогенные активирующие факторы, вызывающие рост опухо­ли [2, 4]. К таким факторам следует отнести и по­ловые гормоны, в частности эстрогены, которые являются важными регуляторами секреции про­лактина и гонадотропинов [5, 6]. Это подтвержда­ется как клиническими, так и экспериментальны­ми данными, когда длительное введение больших доз эстрогенов может вызвать развитие пролактин- секретирующих опухолей гипофиза. Однако место действия и механизмы влияния эстрогенов в про­цессе возникновения опухолей до конца не извест­ны. Еще менее изучена роль андрогенов.

Проведенные нами исследования в некоторой степени компенсируют этот пробел [1]. Было про­ведено определение концентрации ядерных рецеп­торов эстрадиола и тестостерона в пролактинсек- ретирующих аденомах гипофиза. Опытный мате­риал был получен после оперативного вмешатель­ства у 19 больных с пролактинсекретирующей опу­холью аденогипофиза (16 женщин и 3 мужчин), 9 больных с менингиомой у 3 — с астроцитомой у 3 — с невриномой, а также у 2 больных с соматотропи­номой и у 1 — с эпендимомой. Ядерную фракцию клеток выделяли по методу Ghauveau в модифика­ции В. М. Кедровой и Л. В. Орловой [3], основан­ной на различии в плотности ядер и остальных кле­точных элементов. При определении количества мест специфически связанных с ядерной фракцией опухолевых тканей использовали метод J. Anderson и соавт. [8], основанный на обмене меченого гор­мона на немеченый. Количество связывающих мест в ядрах рассчитывали в фентомолях на 1 мг ДНК, а содержание ДНК — по методу К. Burton ИЗ].

Анализ полученных данных свидетельствует о том, что концентрация ядернах рецепторов эстра­диола была максимальной в аденоматозных клет­ках пролактинсекретирующих опухолей гипофиза, составляя 179,7 ± 25,7 фмоль/мг ДНК (см. рису­нок), и превышала концентрацию этих рецепторов в менингиоме и астроцитоме в 3,7 и 5 раз соответ­ственно. Существенно была снижена и концентра­ция эстрадиолсвязывающих мест в невриноме, то­гда как в клетках соматотропиномы число ядерных эстрадиолсвязывающих мест существенным обра­зом не отличалось от концентрации рецепторов эс­традиола в клетках пролактинсекретирующих аде­ном гипофиза.

Аналогичную картину наблюдали и в изменении концентрации ядерных тестостеронсвязывающих аденом гипофиза. Так, число ядерных рецепторов тестостерона в опухолевых клетках, секретирую­щих пролактин и соматотропный гормон, было одинаково (см. рисунок). Однако по сравнению с пролактинсекретирующими опухолями в менин­гиоме и астроцитоме число тестостеронсвязываю­щих мест было снижено в 2 раза, а в невриноме — в 3,7 раза.

Полученные данные позволяют высказать пред­положение о существовании определенной связи между концентрациями рецепторов к эстрадиолу и тестостерону в тех опухолях гипофиза, клетки ко­торых секретируют в избыточных количествах про­лактин, т. е. в пролактиномах. Представляется, что нарушение рецепторного связывания в централь­ных нервных структурах, принимающих участие в регуляции гонадотропной функции гипофиза, а также пролактина, вызывает повреждение меха­низма обратной связи между гипоталамусом, гипо­физом и гонадами. Это подтверждается клиниче­скими симптомами: наличие пролактином сопро­вождается нарушением половой функции (у жен­щин в виде аменореи, галактореи и бесплодия, а у мужчин — снижения или отсутствия либидо, по­тенции и азоспермии). К настоящему времени уточнены некоторые вопросы этиологии, патоге­неза, тактики обследования и лечения больных с гиперпролактинемией опухолевого генеза [1, 4—6], однако роль половых гормонов в патогенезе про­лактинсекретирующих опухолей остается не до конца выясненной. Две конкурирующие теории, одна из которых поддерживает ведущую роль нару­шенного гипоталамического контроля, другая — наличие первичного дефекта гипофизарных клеток на генетическом уровне, рассматриваются сегодня как 2 последовательных этапа образования аденом гипофиза, т. е. этот процесс может быть разделен на 2 фазы: первая фаза включает в себя появление в клетках гипофиза спонтанных или индуцирован­ных мутаций; во второй фазе имеет место влияние эндогенных и экзогенных активирующих факто­ров, одним из которых является различная степень связывания рецептора с половыми гормонами, что способствует росту опухоли.

Известно, что эстрогены являются важными ре­гуляторами секреции пролактина из гипофиза: их введение вызывает увеличение уровня пролактина в крови [21, 44]. Этот стимулирующий эффект эс­трогенов отмечают и в условиях in vitro в эксплан­татах гипофиза [49], в опухолевых клетках адено­гипофиза [35] и первичной культуре аденогипофи­за интактных крыс [79]. Во время менструального цикла у женщин уровень пролактина меняется синхронно уровню эстрогенов с пиком обоих гор­монов в середине цикла [6]. Показано, что длитель­ное введение больших доз эстрогенов может вы­звать развитие пролактинсекретирующих опухолей гипофиза как у крыс, так и у людей [29, 68]. Из­вестно, что эстрогены стимулируют пролиферацию лактотрофов и вызывают развитие пролактинпро- дуцирующих опухолей гипофиза у некоторых ин- бредных линий крыс [68].

Эти данные указывают на то, что эстрогены яв­ляются стимуляторами или модуляторами секре­ции пролактина, однако место и механизм дейст­вия эстрогенов в пролактинсекретирующих клет­ках неизвестны. Еще менее известна роль андроге­нов в регуляции секреции пролактина. У кастриро­ванных крыс обоего пола введение тестостерона увеличивало уровень пролактина в крови [37, 62]. Полученные нами данные о способности андроге­нов специфически связываться с опухолевыми клетками и различающаяся концентрация рецепто­ров тестостерона в зависимости от структуры опу­холи и ее локализации также подтверждают это предположение. Более того, в перспективе можно предвидеть роль эндокринной терапии в диагно­стике и лечении различных пролактинсекретирую­щих опухолей гипофиза. В настоящее время фак­тор клинического применения половых гормонов в лечении пролактином продолжает интенсивно изу­чаться на разных уровнях, и наши данные вносят определенный вклад в анализ фундаментальной проблемы нейроэндокринной патологии.

В свете поставленной задачи важно проследить процесс дифференцировки аденогипофизарных клеток в гипофизе в ходе онтогенеза начиная с мо­мента эмбрионального развития. У плода человека в отличие от грызунов этот процесс происходит при участии специфического активатора, который является общим для лактотрофов и гонадотрофов. У плода человека этот процесс начинается на 12-й неделе беременности [47, 49]. Предполагают, что ЭР могут участвовать в дифференцировке маммо- соматотрофов/лактотрофов и гонадотрофов.

Показано, что ЭР находятся в клетках, содержа­щих пролактин или 0-субъединицу гонадотропи­нов [82]. Анализ экспрессии ЭР выявил их наличие в 85% аденогипофизарных клеток [74]. Включение гормона было обнаружено в иммунореактивных клетках, содержащих пролактин, гормон роста, 0- ФСГ, 0-ЛГ, 0-ТТГ.

Биохимический анализ показал, что ЭР наибо­лее часто встречаются в пролактинпродуцирующих аденомах [81]. Была показана тесная связь между продукцией гормона и экспрессией ЭР [82]. Обна­ружена также связь между мРНК ЭР и продукцией тропных гормонов, вырабатываемых некоторыми опухолевыми клетками [17]. Кортикотропные аде­номы не экспрессируют ЭР. Соматотропные аде­номы, которые не вырабатывают пролактин, также не экспрессируют ЭР. Это позволяет считать, что стимуляция секреции соматотропина под влияни­ем эстрогенов осуществляется другими механизма­ми или осуществляется через маммосоматотрофы.

Вышеприведенные данные убедительно пока­зывают, что ЭР являются определяющим факто­ром, ответственным за экспрессию пролактина в соматотрофах, содержащих фактор Pit-1.

Этот фактор приобретает свою активность после экспрессии гормона роста в ходе беременности и, по-видимому, осуществляет торможение экспрес­сии гормона роста в маммосоматотрофах до начала созревания лактотрофов [22, 23]. Регуляцию экс­прессии ЭР можно объяснить флюктуацией в аде­ногипофизарных клетках в ходе беременности, ко­гда имеет место переход соматотрофов в маммосо­матотрофы и лактотрофы [70]. Большинство иссле­дователей предполагают, что экспрессия ЭР начи­нается в гипофизах плодов с 12-й недели беремен­ности [9, 10]. Если это так, то легко можно объяс­нить начало секреции пролактина и дифференциа­цию гонадотрофов на этой стадии беременности.

У мышей с нарушением экспрессии ЭР форми­рование гонад идет по мужскому типу, и с увели­чением выработки гонадотропинов содержание пролактина снижается [19, 45], однако отмечена дифференцировка лактотрофов [61]. Описаны слу­чаи мутации ЭР у людей [66]. Эти данные предпо­лагают, что наличие ЭР не является обязательным для дифференцировки лактотрофов или гонадо­трофов.

Описание гена ЭР-0 и анализ его распределения в тканях человека показывает его широкую распро­страненность [20]. Необходимы исследования для раздельного изучения генов обоих типов ЭР, чтобы определить роль ЭР в процессе дифференцировки клеток гипофиза. Пока же можно считать, что эс­трогены являются фактором роста лактотрофов. Известно, что лактотрофы пролиферируют в ходе беременности [10, 23], и мелкие аденомы в ходе бе­ременности могут расти [И]. Лечение эстрогенами способствует развитию лактотропной аденомы у транссексуалов [42]. До тех пор пока Pit-1 не был признан регулятором репликации ДНК и клеточ­ной пролиферации [16], клеточно-специфическая экспрессия ЭР в аденомах гипофиза человека пред­полагала позитивную роль этого транскрипцион­ного фактора не только в определении клеточного фенотипа и гормональной активности опухолей, но и в регуляции их роста.

Недостаточность функциональной активности гипофиза может возникать как в детском, так и в зрелом возрасте. У детей причиной нарушения сек­реции гормонов гипоталамо-гипофизарной систе­мы чаще являются генетические нарушения. У взрослых гипопитуитаризм возникает в результате селлярных или параселлярных опухолей, воспали­тельных процессов различной этиологии, аутоим­мунных деструкций как в гипоталамо-гипофизар- ной области, так и в области гипофизарного стебля.

Врожденный множественный дефицит гормо­нов аденогипофиза рассматривается в настоящее время как генетически гетерогенное заболевание. Мутация гена Pit-1, которая ведет к недостаточной продукции гормона роста, пролактина и тиреотро­пина, сопровождается полиморфизмом клиниче­ских проявлений. Мутация гена Ргор-1 дополни­тельно к указанным гормонам приводит к дефици­ту гонадотропинов.

Эпидемиологические и клинические данные свидетельствуют о том, что наличие специфиче­ских стероидсвязывающих белков коррелирует с клиническим ответом на гормональную терапию в 70% случаев рака груди.

Настоящее сообщение показывает, что большая часть аденом гипофиза экспрессируют клеточные (цитоплазматические и ядерные) рецепторы поло­вых гормонов, показывая роль этих гормонов в контроле гипофизарных опухолей и/или пролифе­рации. Данные литературы и наши данные пока­зывают наличие рецепторов эстрадиола, прогесте­рона, а также андрогенов в исследованных опухо­лях. Особый интерес представляют доказательства наличия рецепторов к андрогенам в ядерной фрак­ции, что было весьма спорным до настоящего вре­мени.

Рецепторы в субклеточных фракциях могут быть рассмотрены в случае идентификации опухоли в клетках аденогипофиза. Особенно важно знать со­отношение рецепторов к половым гормонам в ци­топлазматической и ядерной фракции. Дискута- бельным остается вопрос о зависимости этого по­казателя от концентрации половых гормонов в крови. До сих пор такая взаимозависимость четко не показана, особенно если учесть фактор отсутст­вия данных о наличии и распределении исследо­ванных рецепторов в интактных гипофизах челове­ка. В опытах на животных показано наличие 3 ти­пов клеточных рецепторов в аденогипофизе (ЭР, прогестероновых и андрогенных рецепторов) и то, что их концентрация и распределение определяют­ся содержанием соответствующих половых гормо­нов — эстрогенов, прогестерона и андрогенов. Особенно это характерно для ядерных рецепторов [34]. Такая комплексная регуляция объясняет тот факт, что экспрессия клеточных рецепторов in vivo определяется полом, возрастом, стадией полового цикла, кастрацией или заместительной гормональ­ной терапией и одновременно объясняет отсутст­вие четких коррелятивных связей между концен­трацией половых гормонов в крови и наличием со­ответствующих им рецепторов в аденогипофизар­ных клетках при патологических состояниях. По­казательно отсутствие андрогенных рецепторов в цитозольной фракции аденом гонадотропных кле­ток, тогда как в нормальных гонадотропных клет­ках эти рецепторы обнаружены. Этот факт можно объяснить тем, что у таких пациентов большая часть андрогенных рецепторов локализована в ядерной фракции опухолей гонадотропных клеток.

Высокая концентрация клеточных рецепторов к половым гормонам в опухолевых клетках аденоги­пофиза подтверждает участие андрогенов и прогес­терона наравне с эстрогенами в патогенезе и раз­витии опухолей гипофиза. Влияние гормонов мо­жет быть как прямым, так и опосредованным, на­пример действие эстрогенов на кровоснабжение аденогипофиза [60], вызывающее геморрагии и некроз гипофизарных аденом при лечении эстро­генами [53]. Высокая экспрессия ЭР обнаружена при геморрагических опухолях, а также у женщин, оперированных в past-partum-period, с высоким со­держанием эстрогенов, который отмечен в период беременности. Стероиды также могут модулиро­вать клеточную пролиферацию на рецепторном уровне [15]. Отмечена повышенная митотическая активность эстрадиол-рецепторных опухолевых клеток [55].

Изложенные нами данные о чувствительности опухолевых клеток к половым гормонам важны как с физиологической, так и с терапевтической точки зрения. Можно предположить, что вторичный ги­погонадизм, вызванный опухолью, может быть в некоторых случаях следствием стероидного окру­жения, которое становится благоприятным для развития опухоли. Так, у мужчин с опухолью гипо­физа низкий уровень тестостерона может опосре­дованно способствовать клеточной пролиферации за счет повышенной экспрессии ЭР и поддержи­вать физиологически тормозное действие андроге­нов на клеточную пролиферацию. С другой сторо­ны, клиницисты должны настороженно относиться к возможным эффектам стероидов и антистероид- ных препаратов, применяемых для лечения опухо­лей.