Preview

Проблемы Эндокринологии

Расширенный поиск

Ультраструктура и функция лимфоцитов крови у детей с впервые выявленным нелеченым сахарным диабетом 1-го типа

https://doi.org/10.14341/probl20055158-13

Полный текст:

Аннотация

Методом проточной цитометрии (FACS-анализ), световой и электронной микроскопии, а также проведения цитотоксического теста исследовали лейкоцитарный состав, содержание, ультраструктуру и функцию различных популяций лимфоцитов (CD3+-, CD4+-, CD8+-, CD20+- и CD56+-клеток) в крови 90 детей с нелеченым впервые выявленным сахарным диабетом 1-го типа в возрасте 8-15лет. Контрольная группа состояла из практически здоровых детей (п = 45). Установлено, что у больных детей отмечается небольшое, но статистически достоверное снижение в крови относительного и абсолютного содержания CD3+, CD4+, CD56+--клеток, индекса CD4/CD8 и особенно больших гранулосодержащих лимфоцитов (морфологического гомолога естественных клеток-киллеров). Ультраструктурно в CD4+--клетках (лимфоцитах, содержащих тельца Галла) выявляются признаки повышенной функциональной активности, в то время как в ЕК-клетках (больших гранулосодержащих лимфоцитах) - снижение, что подтверждается ослаблением цитотоксической активности этих клеток, определенных in vitro. Трехмесячная инсулинотерапия, приводящая к восстановлению содержания глюкозы и гликозилированного гемоглобина в крови, не вызывает нормализации выявленных изменений показателей Т- и ЕК-клеточного иммунитета.

Для цитирования:


Зак К.П., Грузов М.А., Афанасьева В.В., Малиновская Т.Н., Попова В.В., Куликовская А.В., Семионова Т.А., Захарченко Т.Ф. Ультраструктура и функция лимфоцитов крови у детей с впервые выявленным нелеченым сахарным диабетом 1-го типа. Проблемы Эндокринологии. 2005;51(5):8-13. https://doi.org/10.14341/probl20055158-13

For citation:


Zak K.P., Gruzov M.A., Afanasyeva V.V., Malinovskaya T.N., Popova V.V., Kulikovskaya A.V., Semionova T.A., Zakharchenko T.F. The ultrastructure and function of lymphocytes in children with first detected untreated type 1 diabetes mellitus. Problems of Endocrinology. 2005;51(5):8-13. (In Russ.) https://doi.org/10.14341/probl20055158-13

В настоящее время установлено, что сахарный диабет 1-го типа (СД1) является аутоиммунным заболеванием, при котором происходит селективная деструкция инсулинпродуцирующих р-клеток поджелудочной железы [3,4, 9]. В результате этого развивается гипоинсулинизм и нарушается гомеостазис глюкозы, т. е. возникает аутоиммунный инсулинзависимый сахарный диабет. Вместе с тем многие иммунные механизмы этиопатогенеза СД1 остаются недостаточно изученными. Как известно, большую роль в механизмах разрушения островков Лангерганса играют различные иммунорегулятор- ные клетки [7, 11]. Имеется значительное количество работ, преимущественно экспериментального характера, в которых приводятся данные о содержании и функции различных субпопуляций лимфоцитов при СД1 [3, 7]. Однако что касается развития СД1 у человека, то по этому вопросу пока нет единого мнения. В определенной мере это объясняется тем, что разные авторы обследовали неидентичные группы больных. Например, к группе пациентов с впервые выявленным СД1 одни авторы относили пациентов, у которых иммунологические показатели определяли непосредственно после установления диагноза, другие — через 3—6 мес после выявления заболевания на фоне инсулино- терапии. При этом вид используемого препарата и курс лечения инсулином были также неодинаковыми. К сожалению, еще и сейчас публикуются работы, в которых иммунофенотип лимфоцитов при СД1 определяют с помощью розеткообразования. Работы, в которых изучали иммунофенотип и функцию лимфоцитов впервые выявленных больных детей до инсулинотерапии с помощью современных методов исследования, единичны и противоречивы [2, 3, 11]. Почти отсутствуют публикации, посвященные субмикроскопическому строению лимфоцитов при СД1, дающие информацию о функции их определенных видов.

В связи с вышеизложенным задачей настоящего исследования явилось изучение количества, ультраструктуры и функции различных популяций лимфоцитов у детей с впервые выявленным СД1, которые до первого взятия крови никогда не получали инсулин или какие-либо другие сахароснижающие средства. Подбор таких больных составлял определенную сложность, так как во многих случаях дети поступают в реанимацию уже в критическом состоянии, нередко даже в коме, и им немедленно вводят инсулин.

Материалы и методы

Обследовано 90 детей обоего пола (42 мальчика и 48 девочек) в возрасте от 8 до 15 лет. Диагноз СД1 у этих детей впервые был поставлен при профилактических осмотрах или при направлении на консультацию к врачам других специальностей согласно классификации и требованиям Комитета экспертов ВОЗ (1999). Все пациенты до определения иммунологических показателей не получали инсулин или другие сахароснижающие препараты. В группу обследуемых были включены только тщательно отобранные больные, у которых отсутствовали какие-либо воспалительные заболевания и не было выраженных сосудистых или других осложнений.

Контрольная группа состояла из 45 практически здоровых детей обоего пола и сопоставимого с больными детьми возраста, у которых уровень глюкозы натощак и после нагрузки был в пределах нормы.

Содержание глюкозы и гликозилированного гемоглобина (НЬ А) в крови определяли общепринятым методом, концентрацию С-пептида в сыворотке крови — радиоиммунологическим методом, используя стандартные наборы "Cis bio-International" (Франция).

Общее число лейкоцитов подсчитывали традиционным способом. Лейкоцитарную формулу определяли в мазках крови на 200 клеток, окрашенных по Паппенгейму, используя фосфатный буферный раствор (pH 6,85), выделяя в отдельную группу большие гранулосодержащие лимфоциты (БГЛ), являющиеся морфологическим гомологом естественных клеток-киллеров (ЕК-клеток).

Определение содержания и распределения лимфоцитов различного иммунологического фенотипа проводили методом проточной цитометрии с использованием лазерного цитофлюориметра "FACS tar plus" фирмы "Becton Dickinson" (CILIA). Моно- нуклеары выделяли методом дифференциального центрифугирования в градиенте плотности фи- колла—уротраста и инкубировали в пластиковых чашах в СО2-инкубаторе в течение 1 ч для устранения моноцитов. Поверхностные антигены лимфоцитов метили моноклональными антителами, маркированными флюоресцеина изотиоционатом или фикоэритрином. Использовали моноклональные антитела фирм "Becton Dickinson" (США) и "Сорбент" (Россия) к поверхностным антигенам: CD3+ (все Т-лимфоциты), CD4+ (Т-индукторы/хелперы), CD8+ (Т-супрессоры/киллеры), CD20+ (В-лимфо- циты) и CD56+ (ЕК-клетки).

Для электронно-микроскопического исследования выделенную лейкоцитарную пленку фиксировали 2,5% глутаральдегидом на 0,1 М какодилатном буфере фирмы "Fluka" (Германия) с 2% сахарозой, постфиксировали 1% тетраокисью осмия на том же буфере, проводили через спирты и безводный ацетон, заключали в аралдит фирмы "Fluka". Ультра- тонкие срезы готовили на микротоме LKB-8800 (Швеция) и исследовали под электронным микроскопом фирмы JEM-100C (Япония).

У части больных (л = 7) и здоровых детей (л = 10) определяли цитотоксическую активность ЕК-клеток с помощью разработанного нами 4-часового теста. Выделенные из периферической крови (ПК) лимфоциты, очищенные от моноцитов клетки-эффекторы смешивают с клетками-мишенями культуры К562, меченными FITC — йодидом пропидия. Количество лизированных клеток-мишеней определяли с помощью проточного цитофлюориметра "FACS tar plus" фирмы "Becton Dickinson" (США).

Результаты и их обсуждение

Как видно из табл. 1, у детей с впервые выявленным СД1 до назначения им лечения не было обнаружено достоверных изменений со стороны общего количества лейкоцитов, нейтрофилов (палочкоядерных и сегментоядерных) и базофилов в ПК по сравнению с детьми контрольной группы. Наблюдались умеренная лимфоцитопения, в основном за счет значительного снижения количества БГЛ. Относительное и абсолютное содержание эозинофилов и моноцитов в ПК было несколько повышено (р < 0,05).

Для обследуемой группы больных детей было характерно небольшое, но статистически достоверное снижение относительного и абсолютного содержания общего количества Т-лимфоцитов (СОЗ*-клеток) и одной из их важнейших регуляторных субпопуляций — СО4+-клеток. Как известно, популяция СЕ)4+-клеток является функционально неоднородной. Она состоит из нескольких субклассов (Till и Th2; CD4+-, CD25+- и CD4+-, СО25+-клетки), соотношение которых может изменяться неоднозначно в зависимости от влияния различных факторов. Можно предположить, что выявленное снижение количества СО25*-клеток обусловлено миграцией из циркуляции субпопуляций СО4*-клеток, экспрессирующих рецептор к ИЛ-2 (CD4*-, СО25+-клеток), что недавно было описано при первичном СД1 [7, 8].

Таблица 1. Лейкоцитарный состав н иммунофснотип лимфоцитов крови у здоровых детей (л = 55) и детей с впервые выявленным нелеченым СД1 (л = 90) (Л/ ± л»)

Показатель

Здоровые дети

Больные дети

Лейкоциты, • 1О’/л

5,73 ±0,17

6,03 ±0,17

Палочкоядерные нейтрофилы:

%

2,03 ±0,17

2,28 ± 0,16

• Ю’/л

0,11 ±0,01

0,13 ± 0,01

Сегментоядерные нейтрофилы:

%

51,76 ± 1,18

51,40 ± 1,26

• Ю’/л

2,98 ± 0,12

3,11 ± 0,13

Базофилы:

%

0,30 ± 0,07

0,53 ± 0,09

• Ю’/л

0,018 ± 0,004

0,03 ± 0,006

Эозинофилы:

%

2,90 ± 0,22

3,71 ± 0,34

’ 10*/л

0,16 ± 0,01

0,22 ± 0,02

Моноциты:

%

5,63 ± 0,24

7,21 ± 0,34*

■ Ю’/л

0,32 ± 0,02

0,43 ± 0,02*

Лимфоциты:

%

34,81 ± 1,11

33,40 ± 1,25

• Ю’/л

1,98 ± 0,08

2,00 ± 0,09

БГЛ:

%

2,74 ± 0,18

1,47 ± 0,19*

■ Ю’/л

0,16 ± 0,01

0,09 ±0,01*

Лимфоциты + БГЛ:

%

37,50 ± 1,10

34,87 ± 1,09*

• Ю’/л

2,12 ± 0,08

2,09 ± 0,09

СВ34-клетки:

%

65,57 ± 1,72

56,33 ± 1,47*

■ Ю’/л

1,39 ± 0,09

1,07 ± 0,06*

СО4*-клетки:

%

42,13 ± 1,30

37,03 ± 1,04*

• Ю’/л

0,98 ± 0,04

0,70 ± 0,04*

СО8*-клетки:

%

22,03 ± 1,00

21,23 ± 0,90

• Ю’/л

0,48 ± 0,04

0,41 ± 0,03

СО20*-клетки:

%

10,06 ± 0,65

9,65 ± 0,62

• Ю’/л

0,25 ± 0,02

0,18 ± 0,01*

СО56*-клетки:

%

14,03 ± 0,88

9,92 ± 0,68*

• 10*/л

0,29 ± 0,02

0,20 ± 0,02*

Индекс CD4+/CD8*

1,98 ± 0,10

1,70 ± 0,06*

Примечание • — р < 0,05 по сравнению со здоровыми детьми

Среднее относительное и абсолютное содержание другой субпопуляции Т-лимфоцитов — CD8*- клеток, как видно из табл. 1, почти не отличалось от такового у здоровых детей. Ввиду этого индекс CD4/CD8 у большинства пациентов был ниже контрольных величин. Процентное содержание В- лимфоцитов (CD20*-клеток) в ПК больных детей не было изменено, но абсолютное их количество было достоверно снижено.

У детей с первые выявленным СД1 отмечалось статистически значимое снижение относительного и абсолютного количества СЭ56+-клеток, т. е. экспрессирующих мембранный антиген, наиболее характерный для ЕК-клеток. Подтверждением того, что для многих больных детей с начальной формой СД1 характерно более низкое количество ЕК-клеток в ПК, является также тот факт, что у этих же пациентов отмечалось, как уже указывалось выше, и снижение содержания БГЛ в ПК. Однако снижение количества БГЛ было более выраженным, чем СО56+-клеток. Не у всех больных имелась коррекция между изменением числа БГЛ и СО56+-клеток, что, по-видимому, объясняется тем, что (как сейчас показано) не все БГЛ являются ЕК-клетками и, наоборот, не все СО56+-клетки содержат в цитоплазме азурофильные гранулы, которые являются одним из морфологических признаков БГЛ.

В предыдущих наших исследованиях [3] было показано, что у детей с впервые выявленным СД1 с особенно низким содержанием СО56*-клеток и БГЛ и у их родителей первой линии также наблюдалось значительное снижение количества ЕК-клеток в ПК. Полученные данные позволяют высказать предположение о том, что такие больные с постоянным низким уровнем ЕК-клеток в ПК принадлежат к особому подтипу больных СД1, в этио- патогенезе которого имеется генетически детерминированный дефект ЕК-клеток, возможно, дефект генов, участвующих в иммунорегуляции, существующий до проявления заболевания и являющийся фактором, способствующим возникновению СД1.

При электронно-микроскопическом исследовании лейкоцитов ПК у детей с впервые выявленным СД1 были обнаружены значительные изменения субмикроскопической организации лимфоцитов, содержащих в цитоплазме особые образования — тельца Голла (ТГ), которые считают морфологическим маркером СО4*-клеток или одной из их популяций [ 1]. ТГ представляют собой гранулоподобные образования округлой, эллипсоидной, гантелеподобной или неправильной формы с электронно-светлым центром и электронно-плотной периферией. Соотношение этих двух разных по электронной плотности частей варьирует. Возле ТГ нередко определяется кластер электрон но-плотных гранул разного размера.

Ультраструктура лимфоцитов крови, содержащих ТГ (а—в) и БГЛ (г—е).

По сравнению с лимфоцитами, содержащими ТГ, в ПК. здоровых детей (см. рисунок, а), лимфоциты с ТГ больных детей (см. рисунок, б, в) имели более высокое ядерно-цитоплазматическое отношение, более диспергированный хроматин в ядре и большое ядрышко с хорошо выраженным фибриллярным центром и обширной ячеистой периферией, что характерно для клеток с повышенной активностью. Кластер гранул вокруг ТГ в цитоплазме таких клеток состоял из значительно большего количества гранул, которые были гетерогенны как по размеру, так и по электронной плотности. Полученные нами данные согласуются с результатами работы [10], в которой показано, что у больных с начальной формой СД1 наряду со снижением количества СО4+-клеток отмечается значительное повышение количества активированных форм этой субпопуляции (CD4+ НLA-DR).

Значительные изменения ульраструктуры были выявлены также в ЕК-клетках ПК больных. Как уже указывалось, морфологически большинство ЕК-клеток выглядит как БГЛ, т. е. являются клетками, содержащими в обильной цитоплазме азуро- фильные гранулы (см. рисунок, г). На ультраструк- турном уровне в цитоплазме этих клеток выявляются также специфические субмикроскопические образования, получившие название параллельнотрубчатых структур (ПТС), которые в световом микроскопе не видны. У нелеченых больных с только что диагностированным СД1 (см. рисунок, д, е) снижены количество и размер ПТС и азуро- фильных гранул. Последние являются основной органеллой БГЛ, секретирующих перфорин, цитолизины, цитокины, разрыхление их электронноплотного в норме матрикса, а также значительное расширение канальцев гранулярного эндоплазматического ретикулума, структурных компонентов комплекса Гольджи и набухание митохондрий, что можно считать достоверными признаками ослабления цитолитической и секреторной функций ЕК- клеток [3].

Выявленные изменения ультраструктуры БГЛ подтверждаются проведенными нами исследованиями цитотоксической активности ЕК-клеток у обследуемых больных, у них было обнаружено достоверное снижение цитолитической способности ЕК-клеток к клеткам-мишеням культуры К-562 в пропорции 20:1 (28,67 ± 5,8% против 47,50 ± 6,4%, р < 0,05). При этом наблюдалась хорошая корреляция между снижением числа БГЛ и процентом цитотоксичности. Полученные данные согласуются с работами других авторов [5], в которых у впервые выявленных больных СД1 также было обнаружено ослабление цитолитической активности ЕК-клеток при их определении с помощью цитотоксического теста с радиоактивным хромом.

При анализе полученных данных, естественно, возникает вопрос, не являются ли обнаруженные изменения показателей Т- и ЕК-клеточного иммунитета не столько следствием гипоинсулинизма, сколько отражением метаболических нарушений, возникающих в результате недостатка инсулина или каких-либо других причин. В связи с этим у части пациентов (37 человек), у которых через 3 мес после адекватной интенсивной терапии высо- 12 кокачественными препаратами человеческого инсулина (фирм "Novo Nordisk или "Eli Lilly") отмечалась нормализация уровня глюкозы и НЬ А, определенных натощак (табл. 2), были повторно определены все исследуемые показатели. При контроле качества лечения мы придерживались основных показателей, предложенных Европейской установочной группой по СД1 [16].

Как видно из табл. 2, у больных СД1 детей с хорошо контролируемым уровнем углеводного обмена не произошло ожидаемого полного достоверного восстановления показателей иммунитета, не-

Таблица 2 Содержание глюкозы, НЬ А, С-псптида, лейкоцитарный состав и иммунофснотип лимфоцитов в П К детей с впервые выявленным СД1 натощак до и после инсулинотерапии в течение 3 мес

Показатель

До инсулинотс- рапии

После инсулинотерапии

Глюкоза, ммоль/л

12,8 ± 0,32

5,9 ± 0,19*

НЬ А, %

9,31 ± 0,33

6,27 ± 0,14*

С-пептид, нг/л

0,36 ± 0,03

0,32 ± 0,03

Лейкоциты, • Ю’/л

5,55 ± 0,28

5,0 ± 0,23

Палочкоядерные нейтрофилы:

%

2,6 ± 0,45

1,80 ± 0,3

• Ю’/л

0,15 ± 0,002

0,09 ± 0,02

Сегментоядерные нейтрофилы:

%

50,2 ± 1,8

48,3 ± 3,0

• Ю’/л

2,82 ± 0,18

2,37 ± 0,19

Базофилы:

%

0,50 ± 0,12

0,60 ± 0,2

■ Ю’/л

0,02 ± 0,01

0,03 ± 0,01

Эозинофилы:

%

3,62 ± 0,32

5,50 ± 0,8

■ Ю’/л

0,25 ± 0,05

0,31 ± 0,04

Моноциты:

%

6,70 ± 0,36

6,20 ± 0,5

■ Ю’/л

0,40 ± 0,03

0,31 ± 0,03

Лимфоциты:

%

33,85 ± 1,38

35,20 ± 2,5

• Ю’/л

1,58 ± 1,70

1,76 ± 0,15

БГЛ:

%

1,55 ± 0,21

2,70 ± 0,5

• Ю’/л

0,07 ± 0,01

0,14 ± 0,03

СОЗ+-клетки:

%

57,29 ± 1,7

52,86 ± 2,41

• Ю’/л

1,11 ± 0,08

1,94 ± 0,09

СО4+-клетки:

%

34,02 ± 1,66

34.35 ±1,81

• Ю’/л

0,61 ± 0,04

0,66 ± 0,06

СО8+-клетки:

%

21,11 ± 1,16

18,58 ± 0,86*

■ Ю’/л

0,41 ± 0,04

0,37 ± 0,03

CD204-клетки:

%

8,76 ± 0,86

8,06 ± 0,24

■ Ю’/л

0,18 ± 0,03

0,13 ± 0,02

СО5б+-клетки:

%

9,26 ± 0,65

10,51 ± 0,71

• Ю’/л

0,18 ± 0,02

0,19 ± 0,02

Индекс CD4+/CD8+

1,64 ± 0,14

1,80 ± 0,08

Примечание. * — р < 0,05 ло сравнению с показателями до инсулинотерапии.

смотря на лечение, а относительное содержание СD8+-клеток еще больше снизилось.

Для больных детей до лечения было также характерно низкое содержание С-пептида в ПК (0,36 ± 0,02 нг/л против 0,98 ± 0,02 нг/л в норме; р < 0,05). После инсулинотерапии, как видно из табл. 2, не отмечено достоверного изменения среднего содержания С-пептида, так как у части больных его уровень оставался прежним, в то время как у другой, меньшей части он даже повышался. Это согласуется с известными данными [3], указывающими на то, что на самых начальных этапах заболевания после инсулинотерапии возможно повышение образования С-пептида в ПК вследствие устранения тормозящего влияния гипергликемии на еще оставшиеся, способные к функционированию островки Лангерганса.

При электронно-микроскопическом исследовании лимфоцитов ПК у детей, находившихся на заместительной терапии в течение 3 мес, сохранялись те же изменения ультрастурктуры лимфоцитов, что и до лечения. Следует также отметить, что, как показали наши предыдущие наблюдения, у детей, болеющих СД1 более длительный срок (2—5 лет), отмечаются подобные, но еще более выраженные изменения Т- и ЕК-клеточного иммунитета [3].

Таким образом, проведенные исследования показали, что у детей с впервые выявленным СД1 после 3-месячной заместительной инсулинотерапии, приводящей к существенной нормализации углеводного обмена, сохраняются низкие показатели Т- и ЕК-клеточного иммунитета, подобные таковым до лечения. Очевидно, что при компенсации недостаточного экзогенного инсулина удается устранить нарушения метаболизма и сохранить жизнь больных на многие годы, но не нормализовать иммунные нарушения. В связи с этим можно высказать несколько предположений. Во-первых, экзогенный человеческий инсулин все же не совсем идентичен эндогенному, так как при инсулинотерапии не удается полностью моделировать естественные циркадные колебания концентрации гормона в организме. Во-вторых, возможно также, что после разрушения р-клеток прекращается образование не только инсулина, но и каких-то других биологически активных соединений, которые совместно с инсулином или самостоятельно принимают участие в регуляции иммунитета, в частности пептида амилина, который также секретируется р- клетками и оказывает действие, синергичное с инсулином. Недостаточна информация и об участии в аутоиммунных процессах контринсулярных факторов — глюкагона и лептина. Не исключено, что у больных СД1 могут быть и нарушения внепанкреа- тических факторов, имеющих отношение к иммунитету, в частности со стороны генов, контролирующих Т- и ЕК-клеточный иммунитет, что может предшествовать развитию этого заболевания. Можно предположить, что у детей с ослаблением системы Т- и особенно ЕК-клеток, т. е. главной естественной противовирусной системы защиты, различные вирусные заболевания протекают острее, поражая многие жизненно важные органы, в том числе островки Лангерганса поджелудочной железы.

Заключение

У детей с впервые выявленным нелеченым СД1 отмечается небольшое, но статистически достоверное снижение в ПК относительного и абсолютного количества CD3+-, CD4+-, СО56+-клеток, индекса CD4/CD8 и особенно БГЛ (морфологического гомолога ЕК-клеток). Ультраструктурно в CD4+- клетках (лимфоцитах, содержащих ТГ) выявляются признаки повышенной функциональной активности, в то время как в ЕК-клетках (БГЛ) — ее снижение. Трехмесячная инсулинотерапия, приводящая к восстановлению содержания глюкозы и НЬ А в ПК, не вызывает нормализации выявленных изменений показателей Т- и ЕК-клеточного иммунитета. Это дает повод предположить, что либо введение экзогенного инсулина не полностью идентично эндогенно секретируемому инсулину с его циркадными колебаниями, либо обнаруженные изменения обусловлены не только гипоинсулиниз- мом, но и другими факторами, связанными с нарушениями иммунного статуса, в частности генетическими и вирусными, которые могут предшествовать развитию заболевания.

Список литературы

1. Афанасьева В.В., Зак К.П., Бутенко А.К. // Цитология и генетика. - 2003. - Т.37, № 1. - С. 56-60.

2. Дедов И.И., Шестакова М.В. Сахарный диабет. - М., 2003.

3. Зак К.П., Малиновская Т.И., Тронько Н.Д. Иммунитет у детей, больных сахарным диабетом. - Киев, 2002.

4. Atkinson М.A., Eisenbarth G.S. // Lancet. - 2001. - Vol.358. - P. 221-229.

5. Baxter A.G., Smyth M.J. // Autoimmunity. - 2002. - Vol.35, № 1. - P. 1-14.

6. European IDDM Policy Group // Cell. Immunol. - 2000. - Vol.199. - P. 15-24.

7. Kukreja A., Cost G., Marker J. et al. // J. Clin. Invest. - 2002. - Vol.109, № 1. - P. 131-140.

8. Lee P.Т., Putnam A., Benlagha K. et al. // J. Clin. Invest. - 2002. - Vol.110, № 6. - P. 793-800.

9. Lemmark A. // N. Engl. J. Med. - 2000. - Vol.342, № 5. - P. 344-345.

10. Peakman M., Warnock Т., Vats A. et al. // Diabetologia. - 1994. - Vol.37, № 2. - P. 155-165.

11. Roep В. Е. // Diabetologia. - 2003. - Vol.46, № 3. - P. 305-321.


Об авторах

К. П. Зак

Институт эндокринологии и обмена веществ им. В.П. Комиссаренко АМН Украины


Украина


М. А. Грузов

Институт эндокринологии и обмена веществ им. В.П. Комиссаренко АМН Украины


Украина


В. В. Афанасьева

Институт эндокринологии и обмена веществ им. В.П. Комиссаренко АМН Украины


Украина


Т. Н. Малиновская

Институт эндокринологии и обмена веществ им. В.П. Комиссаренко АМН Украины


Россия


В. В. Попова

Институт эндокринологии и обмена веществ им. В.П. Комиссаренко АМН Украины


Украина


А. В. Куликовская

Институт эндокринологии и обмена веществ им. В.П. Комиссаренко АМН Украины


Украина


Т. А. Семионова

Институт эндокринологии и обмена веществ им. В.П. Комиссаренко АМН Украины


Украина


Т. Ф. Захарченко

Институт эндокринологии и обмена веществ им. В.П. Комиссаренко АМН Украины


Россия


Для цитирования:


Зак К.П., Грузов М.А., Афанасьева В.В., Малиновская Т.Н., Попова В.В., Куликовская А.В., Семионова Т.А., Захарченко Т.Ф. Ультраструктура и функция лимфоцитов крови у детей с впервые выявленным нелеченым сахарным диабетом 1-го типа. Проблемы Эндокринологии. 2005;51(5):8-13. https://doi.org/10.14341/probl20055158-13

For citation:


Zak K.P., Gruzov M.A., Afanasyeva V.V., Malinovskaya T.N., Popova V.V., Kulikovskaya A.V., Semionova T.A., Zakharchenko T.F. The ultrastructure and function of lymphocytes in children with first detected untreated type 1 diabetes mellitus. Problems of Endocrinology. 2005;51(5):8-13. (In Russ.) https://doi.org/10.14341/probl20055158-13

Просмотров: 147


ISSN 0375-9660 (Print)
ISSN 2308-1430 (Online)