Ближайшие метаболиты прогестерона (4,5-дигидропро-гестероны) - возможные стимуляторы начала родов

При изучении биологических свойств 16а, 17а-цикло- гексано-5а- и 5р-прегнан-3,20-дионов (I) и (II), аналогов ближайших метаболитов природного прогестерона, проявивших антигормональные свойства [7], мы обнаружили [4], что введение этих препаратов песевдобеременным крысам, приведенным в это состояние путем эстрогени- зации (4 дня) и обработки прогестином (14 дней), вызывает резкую деструкцию гипертрофии миометрия, в то же время слабее влияя на эндометрий. Ранее установлено низкое сродство препаратов (I) и (II) к классическому цитозольному рецептору прогестерона (РП) [10]. Исследование ткани матки псевдобеременных животных на наличие еще каких-либо цитозольных рецепторных центров, специфически связывающих тестируемые соединения, показало полное их отсутствие. Все это свидетельствовало, по-видимому, о независимости антигормо- нального действия ди гидросоединений (I) и (II) от РП.

Избирательность антигормонального действия препаратов (I) и (II), приводящего преимущественно к деструкции миометрия, заставила нас заинтересоваться наличием каких-либо других проявлений влияния этих соединений. Для проверки такой возможности было проведено гистологическое исследование влияния (I) и других стероидов ряда прегна-О'-пентаранов (16а, 17а-цик- лоапканопрогестеронов) [6] на ткань матки интактных неполовозрелых самок крыс. Как оказалось, единственным препаратом, давшим заметный эффект, явился 5а- дигидропентаран (I), вызвавший деструкцию эпителия

'Работа выполнена при финансовой поддержке РФПИ, гранд № 02-03-32523.

матки, проявляющуюся в утрате четко выраженного расположения клеток и уменьшении толщины слоя.

Обнаружение такого, по-видимому, мембранотропного эффекта ближайшего метаболита прогестерона представляло несомненный интерес, поскольку эпителий матки играет значительную роль в самом начале беременности в процессе имплантации, образуя "окна", обеспечивающие возможность приклеивания зародыша к его поверхности и образования "ворот" для проникновения зародыша в эндометрий и предотвращения отторжения последним чужеродных белков зародыша [9]. Обнаруженный факт деструкции эпителия мог бы внести изменения в протекание процесса имплантации. В связи с этим был поставлен эксперимент по введению 5а-ди- гидропентарана (I) (по 0,2 мг на животное подкожно) оплодотворенным крысам на 4—7-й день и исследованию состояния матки животных, забитых на 11-й день после оплодотворения.

Материалы и методы

В экспериментах использовали 16а, 17а-циклогекса- но-5а-прегнан-3,20-дион (I), синтезированный ранее [7].

Для обнаружения возможных эффектов 5а-дигидро- 16а,17а-циклогексанопрогестерона (I) и других прегна- О'-пентаранов использовали неполовозрелых самок крыс, которым однократно внутримышечно вводили раствор стероида (по 0,2 мг на животное в масле). Через 1 сут после введения животных декапитировали пдд наркозом, матки выделяли и после обычной гистологической проводки с помощью микротома делали перпендикулярные срезы, которые окрашивали гематоксилином и эозином. Микроскопирование показало, что единственным достоверным результатом действия соединения (I) является деструкция маточного эпителия.

Для изучения влияния препарата (I) на протекание имплантации использовали взрослых самок крыс, которых разделили на 2 группы (контрольную и опытную) по 6 животных. В ходе предварительного обследования оплодотворенных крыс (факт оплодотворения определяли по влагалищному мазку) на 4—9-й день установлено, что имплантация отмечается на 7-й день после оплодотворения.

Подопытным животным на 4, 5, 6, 7-е сутки вводили раствор (I) в масле (по 0,2 мг на животное внутримышечно). На 10—11-е сутки после оплодотворения животных контрольной и опытной групп декапитировали под наркозом, матку и яичники выделяли и подвергали гистологической проводке. Блоки с утолщениями маточных труб разрезали на микротоме перпендикулярно с частотой не менее 20—22 срезов, которые окрашивали гематоксилином и эозином. Данные серийные срезы соответствовали различным сегментам утолщений труб (случайная выборка). Определение результатов проводили на световом микроскопе (ув. 100). Для сравнения и оценки срезы матки разделили на 5 групп по степени децидуализации стромы эндометрия, объема цитотрофобластической инвазии и формирования зародышевых структур: 1-я — с частичной децидуализацией при отсутствии инвазии и сохранении просвета трубы; 2-я — с частичной децидуализацией с началом инвазии при сохранении просвета; 3-я — с полной децидуализацией (просвет отсутствует) без цитобластической инвазии; 4-я — с полной децидуализацией и распространенной цитотрофической инвазией; 5-я — с выявленными экстраэмбриональными структурами (стенка желточного мешка, амниотические мембраны и части зародыша).

Кроме того, учитывали интактные сегменты маток. Отмечены также элементы анэмбрионии (главным образом в 4-й и 5-й группах), отнесенные ко всему числу срезов. Полученные результаты приведены в таблице.

Результаты и их обсуждение

Результаты эксперимента показывают, что введение антигормона не только не снизило возможность имплантации, но даже несколько облепило и ускорило ее протекание. Это проявилось в достоверном увеличении размеров и степени развития зон децидуализации и числа экстраэмбриональных структур. Очевидно, что дигидропрогестины не влияют на уже образовавшиеся "окна" эпителия, но, скорее всего, облегчают бластоцисте доступ к ним. Причина увеличения числа погибших зародышей пока неясна, но может быть связана с воздействием антигормона на оплодотворенную яйцеклетку в полости матки до ее имплантации [8].

Судя по всему, дигидропентараны (I) и (II) и, скорее всего, ближайшие нативные метаболиты прогестерона (5а- и 5р-дигидропрогестероны) действительно не влияют на эндометриальную прогестинную функцию прогестерона и не являются его антагонистами в этом отношении. Это полностью согласуется с полученными ранее предварительными данными [ 11 ] об отсутствии заметного контрацептивного влияния раннего (1—6-й день после оплодотворения) введения 5а-дигидропентарана (I) на число выношенных крысят.

Помимо участия эпителия матки в имплантации, известно [9], что на самых последних стадиях беременности при подготовке к родам происходит почти полное исчезновение маточного эпителия, облегчающее, по-видимому, отторжение плода. Принято считать, что это обусловлено механическим растяжением его под влиянием плода, однако обнаруженное влияние 5а-дигидропента- рана позволяет предположить, что это явление может быть связано с мембранотропным эффектом ближайших метаболитов прогестерона, накапливающихся к концу беременности [9]. Такое предположение заставило нас вернуться к исследованию состояния маточного эпителия в опыте [4] по формированию псевдобеременности и ее прекращению с помощью 5а- и 5р-дигидропентаранов (I) и (II). Как показал просмотр препаратов у животных, обработанных этими соединениями, эпителий матки псевдобеременных крыс, получавших соединение (I), претерпел определенные изменения: он утратил свою целостность, между сохранившимися частями зияют довольно обширные участки либо лишенные его вообще, либо содержащие отдельные характерные клетки эпителия. Имеются участки с резко разреженными клетками. Все это свидетельствует о имеющейся и здесь тенденции к деструкции эпителия матки под влиянием аналога дигидропрогестерона.

Обнаруженное действие 5а-дигидропрегнапентарана (I) подтверждает отмеченную нами [2] независимость его частичного антипрогестинного действия от классического цитозольного РП и, следовательно, неклассический характер прямого действия самого нативного прогестерона на эти ткани. На это же указывает описанная нами ранее [1—3] неспособность 16а, 17а-циклоалканопроге- стеронов с 3—5-членными D'-карбоциклами, обладающих высоким сродством к РП и высокой активностью в тесте Клауберга—Мак-Фейла, влиять на сохранение беременности.

Заключение

Открытая способность аналогов ближайших природных метаболитов прогестерона вызывать деструкцию эпителия матки вкупе с проявленным ими снятием прогестероновой блокады действия окситоцина [5] и последующим деструктивным действием на гипертрофию миометрия [4] доказывают, что первичные метаболиты прогестерона 5а- и 5р~дигидропрогестероны — могут являться наиболее вероятными кандидатами на роль инициаторов родового процесса — своего рода "гормонами родов".