Роль гормонально-цитокиновых взаимодействий в формировании гуморального иммунного ответа

В последнее время показано, что плацента наряду с белково-пептидными гормонами секретирует разнообразные цитокины [6, 12], которые в обычных условиях являются продуктами клеток лимфомиелоидного комплекса. Как гормоны, так и цитокины дают выраженнные иммуномодулирующие эффекты [1, 4]. В фето-плацентарном ком- партменте, несущем признаки генетической чужеродности, активность иммунокомпетентных клеток матери модулируется комплексом биологически значимых соединений, среди которых в первую очередь можно выделить гормон беременности — хорионический гонадотропин (ХГ) и интерфероны (ИНФ) 1-го типа. Эти белки продуцируются трофобластом на протяжении всего периода беременности |5, 6, 12], причем ИНФ-а избирательно усиливает эктопическую секрецию (3-субъединицы ХГ, прямо влияя на экспрессию гена ХГ |7].

Известно, что ИНФ-а и ИНФ-р не только обладают противовирусной активностью, но и дают иммуномодулирующий эффект, близкий таковому ХГ |3|. Однако совместное гормонально-ци- токиновое действие на лимфоидные клетки не оценивалось. По-видимому, подобное воздействие имеет место в гестационный период, а при беременности, осложненной вирусной инфекцией, приобретает решающее значение.

Целью настоящего исследования явилось изучение влияния ИНФ 1-го типа и ХГ, а также их совместного воздействия на уровень адоптивного первичного иммунного ответа.

Материалы и методы

Опыты проводили на мышах-самках линии СВА массой 20-22 г. XT (“Profasi”, Serano, Италия) в концентрациях 10 или 50 МЕ/мл вносили в краткосрочную макрокультуру спленоцитов (2 • 10⁷) клеток на 4 мл среды 199) и инкубировали при 37°С в течение 1 ч. Затем клетки трижды отмывали средой 199 и концентрировали из расчета 2 • 10⁷ клеток в 0,5 мл питательной среды для совместного с антигеном (эритроциты барана 2 • 10⁸) внутривенного введения сингенным, летально облученным (219,3 мКл/кг) реципиента^

Функциональную активность клеток оценивали по уровню ’ адоптивного иммунного ответа на 4-5-е сутки с момента сингенного переноса методом локального гемолиза в геле агарозы [9].

Влияние ХГ и ИНФ 1-го типа на функциональную активность интактных сплсноцитов, реализующих адоптивный первичный иммунный ответ (М ± ти)

р₅.₂ < 0,001

Р5-4 < 0,05

p_s.₂ < 0,001

р₈.₅ < 0,001

П р и м е ч а н и е. Указаны только статистически достоверные различия.

Помимо гормона, в культуры клеток селезенки вносили рекомбинантные ИНФ-а и ИНФ-р (“Д1агностикум”) в концентрациях 250 МЕ/мл, а также их комбинации с разными концентрациями ХГ. В качестве контроля служили клетки, в культуры которых ИНФ и ХГ не вносили, но проводили аналогичные манипуляции.

Жизнеспособность клеток, оцениваемая в тесте с трипано- вым синим, составляла в среднем 95%.

Статистическую обработку результатов проводили, используя t-критерий Стыодента. Во всех расчетах оперировали 1°ёю(1ё) числа антителообразующих клеток (АОК).

Результаты и их обсуждение

Как видно из таблицы, часовая инкубация ХГ в концентрациях К) или 50 МЕ/мл, характерных для II-III или I триместра беременности соответственно 110]. с интактными клетками селезенки приводит к статистически значимому угнетению адоптивного первичного иммунного ответа на тимусзависимый антиген. Внесение в краткосрочную культуру интактных спленоцитов ИНФ-а в концентрации, отражающей средний уровень эндогенной продукции ИНФ 1-го типа при митоген- или вирусиндуцированном ин- терфероногенезе [ 111, статистически достоверно стимулирует процессы формирования АОК. в системе сингенного переноса. ИНФ-р такой способностью в исследуемой концентрации не обладает (см. таблицу).

Одновременное воздействие ХГ и ИНФ-а на иммунокомпетентные клетки селезенки, до их контакта с антигеном, оказывает выраженное иммуностимулирующее действие, интенсивность которого, однако, зависит от дозы ХГ. Так, наиболее высокий уровень адоптивного иммунного ответа наблюдается при комбинациях ИНФ-а с низкой концентрацией гормона, характерной для второй половины беременности. В данном случае можно говорить о костиму- лирующем эффекте низкой концентрации ХГ, так как выявлена достоверная разница между уровнем иммуностимуляции в группах ИНФ-d и ИНФ-а+ХГ (10 МЕ/мл). Что касается высокой концентрации ХГ, то можно лишь констатировать полную утрату ее иммунодепрессивного эффекта при комбинации с ИНФ-а (см. таблицу)-

На фоне ИНФ-р иммунодепрессивные эффекты ХГ, так же как и на фоне ИНФ-а, полностью нивелируются, но при этом достигается статистически достоверное повышение числа АОК, которое было недостоверным при действии только одного ИНФ-Р (см. таблицу). Однако феноменология костимуляции или дозовой зависимости эффектов ХГ при совместном с ИНФ-р воздействии отсутствует.

Поскольку иммуномодулирующая способность ИНФ 1-го типа прямо зависит от исходной активности лимфоцитов [2], ХГ можно рассматривать как гормон, оптимизирующий функционирование иммунокомпетентных клеток, реализующих ИНФ-стимулирующие эффекты. Полученные результаты позволяют говорить, с одной стороны, о доминировании иммунопотенцирующего действия ИНФ 1-го типа, с другой — о ХГ как костимулируюгцем факторе цитокиновых эффектов. С позиции иммунологии репродукции полученные данные поддерживают концепцию плацентарной иммунотрофики [13] и показывают необходимость комплексной оценки иммуномодулирующей активности всех биологически значимых соединений, присутствующих в фето-плацентарной зоне.

Не исключено, что в случае совместного воздействия ХГ и ИНФ усиление гуморального иммунного ответа может служить в качестве механизма, индуцирующего аборт при вирусной инфекции.

Выводы

1. ХГ в концентрациях, характерных для беременности, угнетает способность интактных спленоцитов формировать АОК.
2. ИНФ-а стимулирует процессы формирования АОК, в то время как ИНФ-р нс влияет на уровень гуморального иммунного ответа.
3. При совместном гормонально-цитокиновом воздействии способность спленоцитов формировать АОК достоверно выше вне зависимости от вариантов комбинаций ХГ с разными ИНФ.
4. В концентрации, характерной для второй половины беременности, ХГ усиливает иммуностимулирующий эффект ИНФ-а, выступая в качестве костимулирующего агента.