Preview

Перекисное окисление липидов и гемостаз у больных инсулинзависимым сахарным диабетом

https://doi.org/10.14341/probl11644

Полный текст:

Аннотация

У 358 пациентов (186 мужчин и 172 женщины) в возрасте 29,1 ±1,3 года с инсулинзависимым сахарным диабетом изучали структурно-функциональное состояние тромбоцитарных мембран. Контрольную группу составили 53 здоровых человека такого же возраста. В клеточных мембранах тромбоцитов исследовали фосфолипидные фракции, уровень холестерина, используя метод тонкослойной хроматографии. Исследовали уровень первичных и вторичных продуктов перекисного окисления липидов, супероксиддисмутазы, каталазы, глюкозо-6-фосфатдегидрогеназы, а также активность ферментов трансмембранного транспорта Na*-, К*-, Mg?+- « Са2+-АТФазы. АДФ-индуцированную агрегацию тромбоцитов определяли фотометрическим методом. Установлено, что у больных инсулинзависимым сахарным диабетом имеют место структурно-функциональная дестабилизация тромбоцитарной мембраны, активация процессов перекисного окисления липидов и снижение антирадикальной защиты в зависимости от клинических особенностей инсулинзависимого сахарного диабета, длительности заболевания и компенсации. Дисбаланс в системе проантиоксиданты — антиоксиданты в сторону интенсификации перекисного окисления липидов в тромбоцитах больных ИЗСД приводит к изменению агрегационной способности тромбоцитов, что играет важную роль в формировании ДВС-синдрома, последнее определяет появление и прогрессирование ангиопатий.

Для цитирования:


Нелаева А.А., Бышевский А.Ш., Трошина И.А., Журавлева Т.Д. Перекисное окисление липидов и гемостаз у больных инсулинзависимым сахарным диабетом. Проблемы Эндокринологии. 1998;44(5):10-14. https://doi.org/10.14341/probl11644

For citation:


Nelaeva A.A., Byshevsky A.S., Troshin I.A., Zhuravleva T.D. Lipid peroxidation and hemostasis in patients with insulin-dependent diabetes mellitus. Problems of Endocrinology. 1998;44(5):10-14. (In Russ.) https://doi.org/10.14341/probl11644

В последние годы получены данные, свидетельствующие о возможной роли мембранных нарушений в патогенезе инсулинзависимого сахарного диабета (ИЗСД) [1, 2, 7, 19, 20]. Вместе с тем системных исследований, посвященных установлению связи между интенсивностью перекисного окисления липидов (ПОЛ) и клиническими проявлениями заболевания, не проводили, хотя имеются сведения о состоянии мембран при ИЗСД, позволившие допустить роль гипероксидации в утяжелении ИЗСД [1, 10, 14, 19].

Известно, что ИЗСД часто сопровождается нарушениями гемостаза, сопряженными с патологическими изменениями сосудистой стенки [6, 15, 17]. В свою очередь показано, что состояние гемостаза тесно связано с уровнем ПОЛ [4, 11, 12], что изменение одного из этих процессов сопровождается изменением второго [5, 13, 16], что возможно взаимоусиление этих процессов [4]. Установлено, что в динамике развития экспериментального сахарного диабета (СД) можно наблюдать появление пула гиперактивных тромбоцитов, которые вносят существенный вклад в повышение наклонности к тромбообразованию при этом заболевании [18].

То обстоятельство, что при ИЗСД активируются свободнорадикальные процессы, а также наличие связи между интенсивностью ПОЛ и уровнем тромбинообразования, роль тромбоцитов как клеток, через которые в значительной степени реализуется взаимосвязь тромбиногенез — гипероксидация, роль тромбоцитов в осуществлении первичного и коагуляционного гемостаза, их значение в поддержании целостности сосудистой стенки и в непрерывном свертывании крови, наличие тромбогеморрагических осложнений и развитие микроангиопатий при ИЗСД обусловливают необходимость детального исследования состояний тромбоцитарной мембраны при этом заболевании.

Целью работы явилось изучение у больных ИЗСД клинического значения структурно-функционального состояния липидной фазы мембран тромбоцитов, процессов ПОЛ и агрегационной активности тромбоцитов наряду с показателями, характеризующими коагуляционный гемостаз.

Материалы и методы

Обследовано 358 больных ИЗСД (186 мужчин и 172 женщины), из них у 112 диагностировано неосложненное течение СД, у 141 — ИЗСД с микроангиопатиями, а 105 больных ИЗСД находились в состоянии кетоацидоза. Средний возраст пациентов составил 29,1 ±1,3 года. Продолжительность заболевания составляла от 1 года до 20 лет, средняя потребность в инсулине — 45 ± 0,9 ЕД в сутки. В качестве группы сравнения обследовано 53 здоровых человека идентичного возраста без отягощенного семейного анамнеза по СД.

Определение содержания основных фракций фосфолипидов (ФЛ) — лизофосфатидилхолинов (ЛФХ), фосфатидилсеринов (ФС), сфингомиелинов (СМ), фосфатидилхолинов (ФХ), фосфатиди- лэтаноламинов (ФЭА) и холестерина (ХС) клеточных мембран проводили методом тонкослойной хроматографии. В мембранах тромбоцитов определяли содержание диеновых конъюгатов (ДК), шиффовых оснований (ШО). Об активности ан- тирадикальной защиты судили по содержанию су- пероксиддисмутазы (СОД), каталазы и активности глюкозо-6-фосфатдегидрогеназы (Г-6-ФДГ). В мембранах тромбоцитов исследовали активность ферментов трансмембранного переноса ионов Na+-, К+-, Mg2+- и Са2+-АТФаз. Фотометрическим методом определяли АДФ-индуцирован- ную агрегацию тромбоцитов с определением максимальной агрегации, начальной скорости агрегации, времени достижения 1/2 максимальной агрегации (Т|у2), времени агрегации с помощью агрегометра "Биомак".

Полученные результаты подвергли математической обработке методом вариационной статистики с помощью пакета прикладных программ по статистической обработке информации (SPSS), а также пакета анализа Microsoft Excel на ЭВМ IBM PC (486 DX4).

Рис. 1. Содержание продуктов ПОЛ в мембранах тромбоцитов у больных ИЗСД

а — содержание ДК (в ммоль/мл); б — содержание ШО (в усл. ед.). Здесь и на рис. 2, 3: 1 — здоровые; 2 — ИЗСД без осложнений; 3 — ИЗСД с микроангиопатиями; 4 — ИЗСД с кетоацидозом. * — р < 0,05.

Результаты и их обсуждение

В результате проведенных исследований у больных ИЗСД в зависимости от особенностей клинических проявлений обнаружены значительные изменения липидной фазы мембран тромбоцитов. Необходимо отметить, что уже у больных с неосложненным ИЗСД в мембранах тромбоцитов накапливаются ДК, содержание их повышается при появлении сосудистых осложнений, а максимальных величин показатели ДК достигают у больных ИЗСД в состоянии кетоацидоза, как это наблюдали и другие исследователи [1]. Повышение содержания ШО в мембранах тромбоцитов у больных с неосложненным ИЗСД расценено нами как компенсаторно-приспособительная реакция, направленная на нейтрализацию процессов гипероксидации [8], которая утрачивается при прогрессировании ИЗСД и присоединении микроангиопатий (рис. 1).

В наших исследованиях у больных ИЗСД без осложнений (рис. 2) в клеточных мембранах тромбоцитов установлено достоверное повышение активности СОД по сравнению с показателями у здоровых. Повышение активности СОД у больных ИЗСД без сосудистых осложнений, по-видимому, носит защитный характер и отражает адаптационные возможности организма [10]. У больных ИЗСД с наличием микроангиопатий активность СОД достоверно снижается по сравнению с показателями у больных ИЗСД без сосудистых осложнений, кетоацидоз у больных ИЗСД также сопровождается снижением активности СОД, что согласуется с исследованиями Л. А. Литвиненко [9].

В наших исследованиях антирадикальный эффект каталазы также повышен у больных ИЗСД без осложнений, в то же время у больных* в состоянии кетоацидоза происходит значительное снижение активности каталазы по сравнению с показателями у больных ИЗСД без осложнений.

Активность Г-6-ФДГ у больных ИЗСД с неосложненным течением снижена в отличие от активности данного фермента у здоровых лиц. При наличии микроангиопатий у больных ИЗСД активность Г-6-ФДГ наименьшая, что может косвенно свидетельствовать о выраженной гипероксидации у обсуждаемой группы больных. Таким образом, на основании иссле-

Рис. 2. Показатели активности антиоксидантных ферментов в мембранах тромбоцитов у больных ИЗСД.

а — активность СОД (в усл. ед. торм/мг белка); б — активность Г-6-ФДГ (в млн ед. акт/мг белка); в — активность каталазы (в мкмоль/мин/мг белка).

дований можно предположить, что с нарастанием длительности и тяжести ИЗСД процессы ПОЛ интенсифицируются в такой степени, при которой компенсаторные возможности системы антиоксидантной защиты оказываются недостаточными.

Нарушение равновесия между про- и антиоксидантными механизмами клеточных мембран является одной из основных причин структурной перестройки липидной фазы мембран у больных ИЗСД (табл. 1). При сравнении нарушений фосфолипидного состава мембран тромбоцитов у больных ИЗСД без осложнений и у больных ИЗСД с микроангиопатиями видно, что повышение содержания ЛФХ и снижение уровня ФХ происходит при обеих клинических группах ИЗСД. Уровень ФС, ФЭА и суммарных ФЛ ниже в мембранах тромбоцитов у больных ИЗСД с микроангиопатиями. Содержание ХС и увеличение коэффициента отношения ХС/ФЛ также более выражено у больных ИЗСД с сосудистыми осложнениями.

В связи с обнаруженными нами изменениями структурно-функционального состояния мембран тромбоцитов у больных ИЗСД изучение агрегационной активности и гемореологических наруше-

Таб ли ца 1

Содержание основных фракций ФЛ и ХС в мембранах тромбоцитов у больных ИЗСД (в ммоль/мл; М ± т)

Показа

Здоровые

Больные ИЗСД без

Больные ИЗСД с

тель

осложнений

микроангиопатиями

ЛФХ

0,009 ± 0,001

0,012 ± 0,001*

0,016 ± 0,004**

ФС

0,017 ± 0,001

0,018 ± 0,001

0,017 ± 0,001

см

0,034 ± 0,001

0,032 ± 0,002

0,030 ± 0,001

ФХ

0,063 ± 0,003

0,058 ± 0,001*

0,053 ± 0,001**

ФЭА

0,038 ± 0,003

0,033 ± 0,002*

0,030 ± 0,001

ФЛ

0,161 ± 0,006

0,153 ± 0,002*

0,146 ± 0,001**

ХС

0,247 ± 0,015

0,297 ± 0,06*

0,38 ± 0,012**

ХС/ФЛ

1,53 ± 0,03

1,90 ± 0,01*

2,60 ± 0,17**

Примечание. Здесь и в табл. 2: звездочки — достоверность различий: одна — между показателями здоровых и больных ИЗСД без осложнений, две — между показателями больных ИЗСД без осложнений и больных ИЗСД с микроангиопатиями.

Рис. 3. Количество тромбоцитов (в тыс/мкл) и их агрегационная активность (максимальное светопропускание; в %).

I — количество тромбоцитов; II — агрегационная активность.

ний, а также определение их связи с дестабилизацией липидной фазы мембран тромбоцитов представляет большой интерес.

В настоящей работе установлено, что у больных ИЗСД без осложнений достоверно уменьшено абсолютное количество тромбоцитов крови, одновременно с этим снижена АДФ-индуциро- ванная агрегационная активность данных клеток крови на 27% по сравнению с показателями у здоровых (рис. 3). Механизм агрегации тромбоцитов, вызываемый АДФ, окончательно не выяснен. Это энергетически зависимая реакция, которая осуществляется только активными в метаболическом отношении тромбоцитами [3]. Наряду с изменением агрегационной способности тромбоцитов у больных ИЗСД без осложнений установлено изменение характера агрегатограм- мы: достоверно уменьшаются и начальная

скорость агрегации по сравнению с показателями у здоровых, в то же время достижение максимальной агрегации у больных ИЗСД без осложнений практически не отличается от показателей у здоровых. Можно предположить, что у больных с неосложненным ИЗСД преобладает необратимая фаза агрегации, которая обусловлена комплексом влияния нескольких агрегирующих агентов (АДФ, тромбина, коллагена и т. д.); нельзя исключить влияние повреждения сосудистой стенки, при которой агрегация практически всегда протекает как необратимый процесс и способствует внутрисосудистому тромбообразо- ванию. При этом установлено, что при компенсации СД наблюдается тенденция к нормализации показателей начальной скорости агрегации И Т1/2.

Механизм связи между гемокоагуляцией и ПОЛ можно представить следующим образом: продукты ПОЛ, накапливающиеся при состоянии напряжения, атакуют ФЛ клеточных мембран, вызывая в экстремальных ситуациях повреждения, пропорциональные степени активации ПОЛ [4]. Структурно-функциональные изменения мембран — причина экспрессии неполного и тканевого тромбопластинов (феномен "флип-флоп"), в результате которого на плазматическую мембрану перемещаются ФЛ, свойственные внутреннему компоненту липидного бислоя. Это повышает коагуляционную активность клеток крови и клеток сосудистого эндотелия [3, 4, 13]. Изменения липидного бислоя мембран при активации ПОЛ, кроме того, ускоряют синтез тромбоксана В2 и простациклина. Их соотношение сдвигается в пользу тромбоксанов, что может обусловливать гиперкоагуляцию. При длительной активации ПОЛ происходят выраженные метаболические изменения на уровне мембран тромбоцитов, что энергетически истощает данные клетки крови; с другой стороны, активация ПОЛ, изменение фосфолипидного состава мембран тромбоцитов, повышение агрегационного потенциала данных клеток крови способствуют повышению активности внутрисосудистого свертывания крови [16], и оба фактора, оказывая влияние на АДФ-индуциро- ванную агрегацию тромбоцитов, вызывают ее угнетение.

Данное предположение подтверждается проведенным корреляционным анализом между активностью ПОЛ, фосфолипидным составом мембран тромбоцитов, уровнем антиоксидантных ферментов и агрегационной способностью данных клеток крови. Установлена достоверная корреляционная связь между уровнем ДК и АДФ- индуцированной агрегацией тромбоцитов (г = —0,7; р < 0,001), между ШО и АДФ-индуци- рованной агрегацией (г = —0,5; р < 0,05), между ШО и Tj/2 О* = ~0,7; р > 0,05). Анализируя полученные корреляционные связи, можно предположить, что активация ПОЛ способствует изменению функциональных способностей тромбоцитов, что выражается в снижении ответа данных клеток крови на индукцию АДФ. Из полученных взаимосвязей структурно-функционального состояния мембран тромбоцитов с показателями агрегационной активности тромбоцитов наибольший интерес представляет положительная взаимосвязь уровня ЛФХ в мембранах тромбоцитов с уровнем АДФ-индуцированной агрегации (г = 0,85; р < 0,05), так как накопление ЛФХ в клеточных мембранах тромбоцитов неразрывно связано с гемолизирующим влиянием на клеточные мембраны и выходом в кровеносное русло АДФ — химического индуктора агрегации тромбоцитов.

Исследование гемокоагуляционных изменений у больных ИЗСД (табл. 2) свидетельствует о наличии у данных пациентов непрерывного внутрисосудистого свертывания (ДВС) крови в стадии гипокоагулемии потребления при одновременной активации противосвертывающих механизмов (рост общей антитромбиновой активности), появлении положительных паракоагуляционных проб.

Исследование тромбоцитарного звена гемостаза у больных ИЗСД с микроангиопатиями свидетельствует об однонаправленности изменений, как и у больных ИЗСД с неосложненным течением.

Нами установлено также, что агрегационная активность тромбоцитов у больных ИЗСД с микроангиопатиями зависит от компенсации СД. На фоне компенсации СД происходит повышение способности тромбоцитов к АДФ-иду- цированной агрегации тромбоцитов до 78% по сравнению с 62% у больных ИЗСД с микроангиопатиями на фоне декомпенсированного углеводного обмена. Возможно, это обусловлено тем, что компенсация СД сопровождается уменьшением интенсивности ДВС-синдрома у

Таблица 2

Показатели гемокоагуляции у больных ИЗСД

Показатель

Здоровые

Больные ИЗСД без осложнений

Больные ИЗСД с микроангиопатиями

ПТИ, %

89,4 ±

о,з

91,1

+

0,2*

94,3

±

0,7

АВР, с

68,1 ±

о,з

122,2

+

3,2*

103,5

±

1,2**

АЧТВ, с

43,2 ±

0,8

61,2

±

1,2*

82,4

±

Q 9**

АА, %

100

149

±

0,9*

142

±

1,8

ФГ, г/л

3,8 ±

0,2

3,1

±

0,7

4,12

±

0,9**

Ф XIII

67,1 ±

1,2

66,3

±

0,9

64,1

+

0,8

ЭТ, % (частота об

наружения)

0

16,1

±

0,8*

23,2

±

0,6**

Фибриноген В, %

0

32,5

+

0,3*

42,5

±

0,4*

больных ИЗСД, одновременно с этим увеличивается количество метаболически активных тромбоцитов, которые способны ответить на индукцию АДФ.

Результаты коагуляционных нарушений у больных ИЗСД (см. табл. 2) свидетельствуют о достоверном удлинении активированного времени свертывания по сравнению с показателями у больных ИЗСД с неосложненным течением, при этом частота паракоагуляционных проб у больных ИЗСД с микроангиопатиями увеличивается на 6,1% по сравнению с показателями у больных ИЗСД без микроангиопатий, это свидетельствует о более выраженном ДВС-синдроме у больных ИЗСД с микроангиопатиями на стадии гиперкоа- гулемии потребления.

Чрезвычайно актуально изучение тромбоцитарно-коагуляционного гемостаза у больных ИЗСД в состоянии кетоацидоза. Установлено, что у больных ИЗСД в состоянии кетоацидоза АДФ-индуцированная агрегация имеет наименьшую величину по сравнению с показателями у больных ИЗСД с неосложненным течением и наличием микроангиопатий (см. рис. 3). Это, вероятно, обусловлено глубокими метаболическими нарушениями тромбоцитов у обсуждаемой группы больных. В то же время изменяется характер агрегатограммы — достоверно значимо укорачивается время максимальной агрегации по сравнению с показателями у больных ИЗСД с микроангиопатиями и с неосложненным течением (р < 0,001). Принимая во внимание результаты исследования, можно предположить, что выраженные изменения тромбоцитарного гемостаза у больных ИЗСД в состоянии кетоацидоза во многом обусловлены нарушением фосфолипидного состава клеточных мембран тромбоцитов. Это подтверждается наличием корреляционной связи между уровнем ХС в мембранах тромбоцитов у обсуждаемой группы больных и АДФ-индуцированной агрегацией тромбоцитов (г = —0,58; р < 0,05), отношением ХС/ФЛ и АДФ-индуцированной агрегацией тромбоцитов (г = —0,49; р < 0,04). Результаты исследования гемокоагуляционного гемостаза у больных ИЗСД в состоянии кетоацидоза свидетельствуют о наиболее выраженных изменениях в системе гемостаза у обсуждаемой группы больных: показатели активированного времени рекальцификации и частично активированного времени рекальцификации достигают максимальных величин по сравнению с показателями у больных ИЗСД без осложнений и с микроангиопатиями (см. табл. 2). В то же время у больных ИЗСД в состоянии кетоацидоза достоверно повышается антитромбиновая активность, сохраняется тенденция к снижению уровня фибриногена и повышению содержания продуктов деградации фибрина в 3 раза больше, чем у больных ИЗСД без осложнений и с микроангиопатиями. Полученные результаты свидетельствуют о наличии у обсуждаемой группы больных выраженного ДВС-синдро- ма, протекающего одновременно с активацией ПОЛ и неразрывно связанного с ним.

Таким образом, исследование мембран тромбоцитов у больных ИЗСД свидетельствует о нарушении структурно-функционального состояния мембран этих клеток крови, активации ПОЛ, нарушении тромбоцитарно-коагуляционного звена гемостаза и неразрывной связи реологических нарушений с активацией ПОЛ, зависимости данных проявлений от клинических вариантов ИЗСД, длительности заболевания и компенсации углеводного обмена.

Выводы

  1. У больных ИЗСД имеет место структурнофункциональная дестабилизация липидной фазы клеточных мембран тромбоцитов. Данные изменения усугубляются по мере прогрессирования ИЗСД.
  2. Одним из механизмов, приводящих к дестабилизации клеточных мембран тромбоцитов у больных ИЗСД, являются избыточная активность ПОЛ, а также снижение антиоксидантной защиты клеточных мембран в виде изменения активности антиоксидантных ферментов.
  3. Мембранопатологические процессы в тромбоцитах у больных ИЗСД зависят от клинических особенностей ИЗСД, длительности заболевания и компенсации СД.
  4. Дисбаланс в системе прооксиданты — антиоксиданты в сторону интенсификации ПОЛ в тромбоцитах больных ИЗСД приводит к изменению агрегационной способности тромбоцитов, что играет важную роль в формировании ДВС- синдрома, последнее предопределяет появление и прогрессирование ангиопатий.

Список литературы

1. Балаболкин М. И. Сахарный диабет. — М., 1994.

2. Балашова Т. С., Гогега Е. Н., Рудько И. А. и др. // Тер. арх. 1993. - № 10. - С. 23-25.

3. Балу да В. П., Балу да М. В., Деянов И. М., Тлешиуков И. К. Физиология системы гемостаза. — М., 1995.

4. Бъииевский А. Ш. // Мед.-биол. вестн. им. Я. Д. Витебского. - 1996. - Т. 2, № 6. - С. 20-21.

5. Галян С. Л. Предупреждение и ограничение витаминами- антиоксидантами нарушений гемостаза, вызываемых тромбинемией: Дис. ... д-ра мед. наук. — Челябинск, 1993.

6. Голубятникова Г. А., Валид Б., Старосельцева Л. К. и др. // Тер. арх. - 1987. - № 7. - С. 109-111.

7. Ефимов А. С. II Всесоюзный съезд эндокринологов, 3-й: Материалы. — Ташкент, 1989. — С. 4—5.

8. Нефропатии (Аспекты мембранологии) / Жмуров В. А., Крылов В. И., Кашуба Э. А., Чимаров В. А. — Тюмень, 1993.

9. Литвиненко Л. А. // Пробл. эндокринол. — 1991. — № 3. С. 6-8.

10. Ляйфер А. И., Солун М. Н. // Там же. — 1993. — № 8. — С. 61-67.

11. Мамаева Г. Г., Будаева И. Н., Анохин Е. Э. и др. // Актуальные проблемы эндокринологии. — М., 1996. — С. 71.

12. Марков Д. С., Мадянов И. В., Маркова Т. Н. //. Там же. — С. 15.

13. Мищенко В. П. // Актуальные проблемы гемостазиологии. М., 1981. - С. 153-157.

14. Науменко В. Г. Жирнокислотный спектр и показатели перекисного окисления липидов в эритроцитах больных сахарным диабетом с диабетическими ангиопатиями: Дис. ... канд. мед. наук. — Киев, 1986.

15. Писарская И. В. // Пробл. эндокринол. — 1987. — № 3. С. 37-40.

16. Соловьев В. Г. К механизму защитного действия витаминов А, Е, С и Р при тромбинемии: Дис. ...канд. мед. наук. — Челябинск, 1991.

17. Спесивцева В. Г., Голубятникова Г. А., Мамаева Г. Г. Нарушение микроциркуляции у больных сахарным диабетом и пути ее коррекции. — Ташкент, 1982. — С. 41—48.

18. Степанян М. Л., Шестакова С. А. // Российский конгресс по патофизиологии. — СПб., 1996. — С. 97

19. Caimi G., Lo Р. R., Montana М. et al. // Diabet. Care. — 1995. - Vol. 18, N 1. - P.60-63.

20. Zentay Z., Reddi A., Raguwanshi M. et al. // Hypertension. — 1992. - Vol. 20. - N 4. — P. 549-554.


Об авторах

А. А. Нелаева

Государственная медицинская академия


Россия


А. Ш. Бышевский

Государственная медицинская академия


Россия


И. А. Трошина

Государственная медицинская академия


Россия


Т. Д. Журавлева

Государственная медицинская академия


Россия


Для цитирования:


Нелаева А.А., Бышевский А.Ш., Трошина И.А., Журавлева Т.Д. Перекисное окисление липидов и гемостаз у больных инсулинзависимым сахарным диабетом. Проблемы Эндокринологии. 1998;44(5):10-14. https://doi.org/10.14341/probl11644

For citation:


Nelaeva A.A., Byshevsky A.S., Troshin I.A., Zhuravleva T.D. Lipid peroxidation and hemostasis in patients with insulin-dependent diabetes mellitus. Problems of Endocrinology. 1998;44(5):10-14. (In Russ.) https://doi.org/10.14341/probl11644

Просмотров: 92


Creative Commons License
Контент доступен под лицензией Creative Commons Attribution 4.0 License.


ISSN 0375-9660 (Print)
ISSN 2308-1430 (Online)