Регенерация щитовидной железы при различной локализации резецированных участков органа

При хирургических вмешательствах на щитовидной железе (ЩЖ) используются варианты частичных резекций с оставлением как центральных, так и периферических участков долей [3, 11]. Структура ЩЖ ряда млекопитающих и человека имеет региональные особенности: краевые отделы органа содержат наиболее крупные фолликулы, между которыми отсутствуют С-клетки (кальцито- циты); последние сконцентрированы преимущественно в центромедиальных участках долей [4, 9]. По мнению ряда авторов, именно центральные отделы ЩЖ, содержащие комплексы фолликул - С-клетки, характеризуются усиленным метаболизмом гормонов и являются наиболее функционально активными как в норме, так и при тиреоидной патологии [2, 8]. В свете этих данных существенный интерес представляет вопрос о наличии особенностей в структуре и функции регенерирующих фрагментов ЩЖ в зависимости от того, какие (центромедиальные или периферические) участки долей являются источником восстановления. Проведение подобного исследования и явилось задачей настоящей работы. Материалы и методы Опыты выполнены на 24 белых крысах (самцы) массой 200-250 г. Операции производили под гексеналовым наркозом (60 мг на 1 кг массы тела внутрибрюшинно). В 2 сериях опытов использованы разные модели частичной резекции ЩЖ (рис. 1). Обязательным условием проведения операций было сохранение одной из двух основных околощитовидных желез, что предотвращало развитие гипокальциемии у крыс [6]. Количество удаленной железистой ткани контролировали в ходе операции взвешиванием резецированных фрагментов на торзионных весах. / серия. 6 крысам рассекали перешеек ЩЖ и удаляли по 40 % каждой доли: слева - центромедиальную, справа - периферическую части (см. рис. 1, б). В результате операции у каждого животного оставались по 2 изолированных друг от друга фрагмента ЩЖ, состоящих преимущественно из центромедиальных (справа) и наружных (слева) участков долей. II серия. Удаляли правую и часть левой доли ЩЖ в двух вариантах (по 6 животных в группе): с сохранением или без сохранения центромедиальных ее участков (см. рис. 1,в,г). Суммарный объем резекции в обоих случаях составил 75 % массы органа. Контролем служили 6 инактных крыс. Через 30 сут после операции животных забивали передозировкой паров эфира. ЩЖ подопытных и контрольных животных взвешивали на торзионных весах, фиксировали по Буэну и заливали в парафин. Срезы толщиной 4-5 мкм окрашивали гематоксилином и эозином, эозин-фосфорномолибденовой килотой-метило- вым синим по Меллендорфу и по Мак-Манусу (ШИК-реак- ция). У интактных животных импрегнационным методом Сиви- ра - Мангера выявляли популяцию С-клеток. У подопытных крыс эту реакцию не проводили, так как ранее нами было показано, что при регенерации ЩЖ количество С-клеток по сравнению с контролем практически не увеличивается, не изменяется и их распределение в доле [7]. В сыворотке крови контрольных и подопытных (II серия) крыс радиоиммунологически (тест-набор отечественного производства) определяли содержание трийодтиронина (Тз) и тироксина (Т«). Винтовым окуляром-микрометром МОВ-1-16Х определяли среднюю высоту фолликулярного эпителия, а также измеряли длинный (Ь) и короткий (В) поперечники фолликулов (по 100 фолликулов у животного). Средний диаметр фолликулов (D) рассчитывали по формуле Е=(Ь+В)/2. Стереологиче- ским методом «полей» с помощью окулярной вставки с 60 равноудаленными точками (об. 40, ок. 7, бинокулярная насадка 1,5Х) определяли относительные объемы тканевых компонентов органа [1], на основании полученных показателей рассчитывали индекс активации ЩЖ - соотношение объемных фракций эпителия и коллоида [10]. Среднее количество С-клеток в единице площади среза определяли на основании изучения у каждого интактного животного 200 квадратных полей зрения размером 100X100 мкм (об. 90, ок. 7, бинокулярная насадка 1,5Х). У контрольных крыс морфометрический анализ проводили раздельно в центромедиальных и краевых участках долей ЩЖ, за условную границу между ними принимали линию разреза долей в I серии). Результаты обрабатывали методами вариационной статистики. Сопоставление средних величин показателей проводили между правосторонними и левосторонними регенератами (I серия), различными вариантами операции (II серия), а также между опытом и соответствующим участком долей ЩЖ в контроле. Результаты и их обсуждение Результаты количественных исследований обобщены в таблице. В центральных отделах ЩЖ интактных животных объемная фракция фолликулярного эпителия и среднее количество С-клеток в единице площади среза.оказались соответственно на 10 % ив 6 раз больше, а средний диаметр фолликулов и относительный объем коллоида - на 26 и 40 % меньше, чем в периферических отделах органа. Как следствие этого, величина индекса активации в центре ЩЖ превышала таковую на периферии в 1,8 раза. В то же время достоверных различий между изученными участками долей в средней высоте фолликулярного эпителия не обнаружено. Анализ распределения диаметров (D) фолликулов пока- Морфофункциональные показатели ЩЖ в контроле и через 30 сут после различных вариантов резекции Показатель Варианты операции (в контроле - соответствующие участки долей ЩЖ) Р с сохранением центромедиальных отделов без сохранения центромедиальных отделов Контроль Средняя высота фолликулярных кле- ток, мкм 1 1,0±0.4 10,9±0,4 >0,05 Относительный объем, %: эпителия 77.1 ± 1,9 69,9±2.5 <0.05 коллоида 10,0±1.4 16,7±2,0 <0,05 Индекс активации 7.7±1.5 4.2±0.7 <0,05 Средний диаметр фолликулов, мкм 46,7±2.0 62,9±3,3 <0.0! Среднее количество С- клеток в поле зрения 2,55±0,2 0,44±0.1 <0,01 / серия Масса регенерата, мг 14,4±0,7 14,3±0.2 >0.05 Средняя высота фолликулярных кле- ток, мкм 13,9±0,7* 13.2±0,5* >0,05 Относительный объем, %: эпителия 8 1,0±1,3 79,6±0,7 >0,05 коллоида 5,9±0.6** 7,4±0,7* >0.05 Индекс активации 13.7± 1,8** 10,8±1,2* >0.05 Средний диаметр фолликулов, мкм 50,5±1,0 52,6±0,8** >0,05 // серия Масса регенерата, мг 19,5±1.3 21.1±1,5 >0,05 Средняя высота фолликулярных кле ток, мкм 12.6±0,4* 13,4±0.4* >0,05 Относительный объем, %: эпителия 85,1 ± 1.2* 82,6±0,8* >0,05 коллоида 2,2±0,3** 1.7±0.2*‘ >0,05 Индекс активации 38.7±6,7** 48,6±7,0‘* >0,05 Концентрация гормонов в сыворот- ке крови, нмоль/л: т, 0,55±0,05 0,62±0,12 >0,05 т. 2,5±1.1 4,2± 1.4 >0.05 Примечание. Одна звездочка - р<0,05; две звездочки - р<0,01 по сравнению с соответствующим участком доли ЩЖ в контроле. У интактных крыс концентрация Тз и Т< составила соответственно 0,58±0,07 и 2,7±0,8 нмоль/л, а масса ЩЖ - 31,9±2,2 мг. зал (рис. 2), что в центромедиальных отделах долей ЩЖ 59 % составляют мелкие фолликулы (D=25-42 мкм), в то время как на периферии преобладают (60%) фолликулы средних размеров (D=50-90 мкм), а также содержится в 4 раза больше крупных фолликулов (D>100 мкм). Сравнение количественных показателей строения правосторонних и левосторонних регенерирующих фрагментов ЩЖ (I серия), а также морфофункционального состояния регенератов после различных вариантов субтотальной резекции органа (II серия) показало, что ни по одному из изученных параметров достоверных различий не обнаружено. При сопоставлении с соответствующим контролем установлено, что в наибольшей степени структура регенерата изменяется, когда источником восстановления является периферический отдел долей. Так, в I серии опытов при резекции центромедиальных участков объемная фракция эпителия возросла на 12 %, коллоида - снизилась в 2,3 раза, индекс активации увеличился в 2,6 раза (при резекции периферических отделов эти показатели изменились в меньшей степени - соответственно на 5 %, в 1,7 и 1,8 раза). В случае сохранения периферических участков обнаружено уменьшение среднего поперечника фолликулов на 16 % по сравнению с контролем за счет возрастания в 2,8 раза относительного количества микрофолликулов диаметром 28-34 мкм. В то же время при сохранении центромедиальных участков средний диаметр фолликулов и характер распределения последних по размерным классам не отличались от показателей соответствующих участков долей ЩЖ в контроле (см. рис. 2). Во II серии в результате аналогичных по направленности, однако более выраженных количественно изменений объемных фракций эпителия и коллоида индекс активации возрос в 11,6 раза по сравнению с соответствующим контролем в случае преимущественного сохранения во время операции периферических отделов ЩЖ и только в 5 раз - при сохранении центромедиальных ее участков. Результаты эксперимента однозначно свидетельствуют, что тиреоидная паренхима как центромедиальных, так и периферических отделов долей ЩЖ в равной мере способна к регенеративному росту, проявляющемуся на клеточном уровне в гипертрофии тироцитов (о чем объективно свидетельствует увеличение средней высоты фолликулярного эпителия [ 10], а на тканевом - в гиперплазии клеток и интенсивном фолликулогене- зе [5]. Это связано, очевидно, с тем, что процессы пролиферации в ЩЖ при ее физиологической и репаративной регенерации протекают мозаично по всему органу [4, 5]. Полученные данные, а также результаты наших более ранних наблюдений [7] о невысоких по сравнению с фолликулярным эпителием пролиферативных потенциях С-клеток и снижении относительного количества последних в паренхиме регенерирующей ЩЖ не дают оснований говорить о существенной роли кальцитоцитов в обеспечении процессов адаптивного роста органа. Тиреоидная паренхима периферических отделов обладает высокой пластичностью и способна к столь же полноценной как в структурном, так и в функциональном отношении регенерации, что и железистая ткань центромедиальных отделов долей, содержащая основную часть внутриорган- ных С-клеток. Выводы 1. Центромедиальные отделы долей щитовидной железы интактных крыс по сравнению с периферическими их участками характеризуются большими величинами относительного объема фолликулярного эпителия (на 10%) и содержания С- клеток в единице площади среза (в 6 раз), а также меньшими значениями среднего диаметра фолликулов (на 26%) и объемной фракции коллоида (на 40 %). 2. Тиреоидная паренхима различных отделов ЩЖ в равной мере способна к полноценной регенерации: через 30 сут после частичной резекции одинаковых по объему центромедиальных или периферических участков долей ЩЖ достоверных различий в количественных показателях строения (масса, объемные фракции тканевых компонентов, средние диаметр фолликулов и высота фолликулярного эпителия) и гормональной активности регенератов между разными вариантами операций не обнаружено.