Preview

Проблемы Эндокринологии

Расширенный поиск

Взаимодействие нистранола с рецепторами эстрадиола и прогестерона в цитозоле матки крыс in vitro и in vivo

https://doi.org/10.14341/probl12073

Полный текст:

Аннотация

Взаимодействие между нистранола с и рецепторами эстрадиола прогестерона в цитозольной фракции ткани матки крыс с оофорэктомией и относительную конкурентную способность нистранола изучали через 24 часа после однократного введения препарата. Результаты демонстрируют влияние нистранола на связывание эстрадиола и прогестерона. Нистранол, стимулирует рост матки у крыс, что объясняется его способностью ускорять транслокацию гормон-рецепторных комплексов в ядро. Исследования способности новых эстрогенов конкурировать с эстрадиолом за связывание в тканях органов-мишеней in vitro и влиять на связывание эстрадиола и прогестерона in vivo позволяют проводить более эффективный скрининг эстрогенов, чем использование только классического метода in vitro.

Для цитирования:


Карева Е.Н., Федотов В.П., Ржезников В.М., Соловьева Е.В., Покровская Е.В. Взаимодействие нистранола с рецепторами эстрадиола и прогестерона в цитозоле матки крыс in vitro и in vivo. Проблемы Эндокринологии. 1996;42(4):33-34. https://doi.org/10.14341/probl12073

For citation:


Kareva Y.N., Fedotov V.P., Rzheznikov V.M., Solovyova Y.V., Pokrovskaya Y.V. Interaction of nistranol with estradiol and progesterone receptors in the rat uterus cytosol in vitro and in vivo. Problems of Endocrinology. 1996;42(4):33-34. (In Russ.) https://doi.org/10.14341/probl12073

Направленный поиск веществ с выраженной эстрогенной активностью привел к созданию соединения, синтезированного в Эндокринологическом научном центре РАМН, — 11р-нитроокси- 9а-гидрокси-этинилэстрадиол-диацетата, получившего название ’’нистранол" [5, 6]. Изучению влияния нового эстрогена на связывание эстрадиола и прогестерона в тканях матки крыс посвящена данная работа.

Исследование способности новых эстрогенов конкурировать с эстрадиолом за связывание в тканях органов-мишеней in vitro и влиять на связывание эстрадиола и прогестерона in vivo дает возможность более эффективного скрининга эстрогенов, чем использование только классического метода in vitro [4].

Материалы и методы

Влияние нистранола на связывание эстрадиола и прогестерона в цитозольной фракции тканей матки крыс изучено на 72 крысах-самках массой 120—140 г, по 6 животных в каждой из исследуемых групп. Масляный раствор нистранола в дозе 0,1— 1 мг/кг вводили внутрибрюшинно на 7-й день после овариэк- томии по методу Я. Д. Киршенблата [3]. В качестве контроля служили животные, которым вводили чистый растворитель. Эвтаназию животных проводили под эфирным наркозом через 24 ч после инъекции препаратов.

Очищенные от жировой и соединительной ткани матки гомогенизировали в жидком азоте. Выделение цитозольной фракции и определение влияния препаратов на связывание эстрадиола и прогестерона в тканях матки крыс осуществляли по методу Л. С. Бассалык [1]. Белок определяли по методу О. Lowry [8]. Для статистической обработки данных эксперимента использовали непараметрический {/-критерий для непарных совокупностей Вилкоксона—Манна— Уитни [2].

Влияние эстрадиола, этинил эстрадиола и нистранола на связывание эстрадиола в цитозольной фракции тканей матки крыс через 1, 6, 24 и 48 ч после их однократного введения изучено на 100 неполовозрелых самках крыс массой 40—45 г методом лигандного обмена [7].

Способность нистранола конкурировать с эстрадиолом за связывание в цитозольной фракции тканей матки крыс in vitro

Таблица 1

Влияние эстрадиола, этинилэстрадиола и нистранола на связывание эстрадиола и прогестерона в цитозольной фракции тканей матки крыс (в фмоль/мг белка)

Вводимое соединение

Связывание

эстрадиола

прогестерона

Растворитель

Эстрадиол (0,1)

Этинилэстрадиол (0,1)

Нистранол (0,1)

43,8 ± 15,3

140,2 ± 35,4*

30,0 ± 9,5*

18,4 ± 8,3*

132.6 ± 16,1

204,2 ± 37,2*

239.7  ± 52,8*

235.8  ± 57,6*

Примечание. Доза всех вводимых соединений составляла 0,1 мг/кг. * — достоверное отличие от контроля при р < 0,05.

изучали, используя метод конкурентного анализа [4]. В опытах использованы матки неполовозрелых крыс массой тела 35— 40 г. Показатель относительной конкурентной способности (ОКС) нистранола вычисляли как процентное соотношение между молярными концентрациями 17р-эстрадиола и конкурента, при которых [2, 4, 6, 7-3Н]-эстрадиол вытесняется из связи с его цитозольными рецепторами на 50%.

Результаты и их обсуждение

Данные о влиянии эстрадиола, этинилэстрадиола и нистранола на связывание эстрадиола и прогестерона (в фмоль/мг белка) в тканях матки крыс через 24 ч после однократного введения в дозе 0,1 мг/кг массы тела животного представлены в табл. 1. Показано, что однократное введение нистранола снижает в 2 раза уровень рецепторов эстрадиола в ткани матки. В то же время введение эстрадиола в дозе 0,1 мг/кг увеличивает содержание его рецепторов в цитозоле тканей матки в 3,2 раза.

Таким образом, нистранол действует на связывание эстрадиола в цитозольной фракции тканей матки подобно этинилэстрадиолу и противоположно эстрадиолу.

Нистранол, этинилэстрадиол и эстрадиол в изученных дозах увеличивали связывание прогестерона через 24 ч после однократного введения. Более выраженное влияние на этот показатель оказали этинилэстрадиол и нистранол, которые увеличивали его в 1,8 раза, тогда как эстрадиол — в 1,5 раза.

Данные о влиянии нистранола, эстрадиола и этинилэстрадиола на связывание эстрадиола в ци-

4

Влияние нистранола (0,1 мкг), эстрадиола (0,5 мкг) и этинилэстрадиола (0,1 мкг) на связывание эстрадиола в цитозольной фракции тканей матки неполовозрелых самок крыс через 1, 6, 24 и 48 ч после однократного введения.

По оси ординат — влияние эстрадиола (/), этинилэстрадиола (2) и нистранола (5) на связывание эстрадиола в цитозольной фракции ткани матки (в % от среднего значения в контрольной группе); по оси абсцисс — время после инъекции (в ч).

Таблица 2

ОКС эстрадиола, этинилэстрадиола и нистранола

Соединение

ОКС

Эстрадиол

100,0

Этинилэстрадиол

150,0 ± 16,8

Нистранол

0,2 ± 0,01

тозольной фракции тканей матки неполовозрелых самок крыс через 1, 6, 24 и 48 ч после однократного введения представлены на рисунке. Через 1 ч после введения эстрадиола и этинилэстрадиола связывание меченого эстрадиола снижается на 75 и 25% соответственно, через 6 ч после введения этинилэстрадиола и нистранола этот показатель снижается на 50 и 80% соответственно. Связывание эстрадиола после введения нистранола и этинилэстрадиола не восстанавливается за 24 ч, тогда как после введения эстрадиола к этому сроку оно возрастает почти в 2 раза. Показанная ранее [5, 6] высокая утеротропная активность нистранола может быть обусловлена его способностью увеличивать скорость транслокации гормон- рецепторных комплексов в ядро, что также объясняет низкую концентрацию цитозольных рецепторов эстрадиола в тканях матки крыс, получавших нистранол.

Критерием способности нистранола конкурировать с эстрадиолом за связывание в цитозольной фракции тканей матки крыс in vitro служит показатель ОКС нистранола, представленный в табл. 2. Полученные результаты показали, что нистранол практически не конкурирует с эстрадиолом за связывание с его цитозольными рецепторами в отличие от этинилэстрадиола, мононитратом диоксипроизводного которого он является.

Выводы

  1. Отсутствие у нистранола способности конкурировать с эстрадиолом in vitro и наличие выраженного влияния на связывание эстрадиола и прогестерона в цитозольной фракции in vivo наряду с выраженным утеротропным эффектом вероятно связано с превращением нистранола в организме в активный(е) метаболит(ы).

При изучении потенциальных лекарственных препаратов с эстрогенной активностью необходимо использовать сочетание методов исследования in vivo и in vitro.

Список литературы

1. Бассалык Л. С. Рецепторы стероидных гормонов. — М., 1987. - С. 198—203.

2. Гублер Е. В. Вычислительные методы анализа и распознавания патологических процессов. — Л., 1978. — С. 72—75.

3. Киршенблат Я. Д. Практикум по эндокринологии. — М., 1969. - С. 139-141.

4. Покровская Е. В., Иваненко Т. И. // Пробл. эндокринол. — 1981. - № 6. - С. 66-70.

5. Ржезников В. М., Иваненко Т. И., Покровская Е. В., Федотов В. П. // Хим.-фарм. журн. — 1986. — № 9. — С. 1057-1061.

6. Ржезников В. М., Иваненко Т. И., Федотов В. П. // Пат. 1202250 РФ, 1993.

7. Katzenellenbogen J. A., Johnson Н. J., Carlson К. Е. // Biochemistry. - 1973. - Vol. 12. - Р. 4092-4093.

8. Lowry О. U. et al. // Anal. Biochem. — 1977. — Vol. 83, № 2. - P. 346-356.


Об авторах

Е. Н. Карева
ГУ Эндокринологический научный центр РАМН; Российский государственный медицинский университет
Россия


В. П. Федотов
ГУ Эндокринологический научный центр РАМН; Российский государственный медицинский университет
Россия


В. М. Ржезников
ГУ Эндокринологический научный центр РАМН; Российский государственный медицинский университет
Россия


Е. В. Соловьева
ГУ Эндокринологический научный центр РАМН; Российский государственный медицинский университет
Россия


Е. В. Покровская
ГУ Эндокринологический научный центр РАМН; Российский государственный медицинский университет
Россия


Рецензия

Для цитирования:


Карева Е.Н., Федотов В.П., Ржезников В.М., Соловьева Е.В., Покровская Е.В. Взаимодействие нистранола с рецепторами эстрадиола и прогестерона в цитозоле матки крыс in vitro и in vivo. Проблемы Эндокринологии. 1996;42(4):33-34. https://doi.org/10.14341/probl12073

For citation:


Kareva Y.N., Fedotov V.P., Rzheznikov V.M., Solovyova Y.V., Pokrovskaya Y.V. Interaction of nistranol with estradiol and progesterone receptors in the rat uterus cytosol in vitro and in vivo. Problems of Endocrinology. 1996;42(4):33-34. (In Russ.) https://doi.org/10.14341/probl12073

Просмотров: 119


ISSN 0375-9660 (Print)
ISSN 2308-1430 (Online)