Нейромедиаторные биоамины в гистогенезе желтых тел

Одним из компонентов эндокринной системы яичников являются желтые тела цикличности, вырабатывающие ряд стероидных гормонов — прогестерон, эстрогены и андрогены [2, 17 ]. В регуляции функции желтых тел принимают участие гонадотропные гормоны гипофиза [2, 4], простагландины [4, 9, 10], перитонеальные макрофаги [14, 15], нейромедиаторные биоамины [4,5,9,10]. Специфическая роль последних проявляется не только в передаче симпатических влияний, но, в частности, и в «пусковом» действии на метаболические процессы, чувствительности тканей к гуморальным стимулам, в синхронизации процессов овариально-менструального цикла [4, 5 ]. Нейромедиаторы являются и посредниками между гормонами и рецеп горно- циклазными системами [1 ]. Изучение этих веществ позволяет установить единство механизмов нейро- гуморальной регуляции гомеостаза [1, 2].

Целью настоящего исследования явилось изучение особенностей нейромедиаторного биоаминового обеспечения желтых тел цикличности на различных стадиях его развития.

Материалы и методы

Исследования выполнены на 27 кошках. Криостатные срезы яичников обрабатывали по методу А. Бъерклунда в модификации В. Н. Швалева и Н. И. Жучковой [8], pH инкубационного раствора составляла при этом 7,0 для одновременного выявления 5-окситриптамина и катехоламинов [12]. Цито- спектрофлюориметрию осуществляли на микроскопе ЛЮ- МАМ-ИЗ с приставкой ФМЭЛ-1А (фильтры ЖС, ФС 1-2, СЗС 24-4, БС 8-3). Тестирование флюоресценции изучаемых структур осуществлялось зондами 0,1 (для элементов нервных волокон) и 0,5 (для макрофагов) при интерференционных фильтрах 8 и 6 (длина волны пропускания соответственно 525 и 480 нм), что позволило микроспектрофлюориметрически идентифицировать соответственно альдегидиндуцированное свечение серотонина и катехоламинов, а также по интенсивности флюоресценции судить об их содержании в исследуемых структурах [3]. Замер интенсивности свечения производился в условных единицах шкалы регистрирующего прибора Щ- 300. Относительное содержание серотонина и катехоламинов определяли в варикозных расширениях и межварикозных участках симпатических терминалей и периваскулярных сплетений, в макрофагах оболочки и паренхимы желтого тела. Стадия развития желтого тела определялась с помощью совокупности данных морфологического анализа, радиоиммуно- логического определения в сыворотке крови прогестерона и эстрогенов, влагалищных мазков, выявления липидов Суданом черным.

Результаты и их обсуждение

Предыдущие наши исследования [6, 7] позволили выделить в яичниках внутриорганный комплекс биоаминового обеспечения (ВКБО). К его основным структурным элементам, участвующим в синтезе, захвате, функциональной реализации, накоплении, транспорте, инактивации серотонина и катехоламинов, относятся периваскулярные симпатические сплетения (ПВС), терминали, макрофаги, сеть кровеносных капилляров с приносящими и выносящими сосудами. После овуляции стенки фолликула спадаются. Полость постепенно заполняется клетками зернистой оболочки и внутренней теки, кровью из сосудов, целость которых нарушается во время овуляции. Вместе с соединительной тканью внутрь формирующегося желтого тела прорастают кровеносные сосуды, в стенке которых отмечается 'флюоресценция периваскулярных сплетений, представляющих собой трехмерные крупно- и мелкопетлистые сети симпатических волокон. От периваскулярных сплетений отходят свободные терминали.

Сплетения паренхимы характеризуются достоверно ' большей плотностью, чем ПВС оболочки желтого тела (соответственно 3,96 + 0,08 и 3,56 + 0,1; р<0,05). Достоверных различий в содержании серотонина и катехоламинов в нервных волокнах паренхимы и оболочки на стадии васкуляризации и пролиферации не выявлено (рис. 1).

На стадии железистого метаморфоза наблюдается усиление флюоресценции ПВС. Микроспект- рофлюориметрический анализ выявляет некоторые различия в степени увеличения содержания н^з^р^с^о^^дз^^агоров в паренхиме и оболочке желтого тела. В последней достоверно более высокий прирост серотонина и катехоламинов отмечается в межварикозных участках, а в паренхиме — в варикозных расширениях. ' ■ При этом содержание неййомедиаторов в «варикозах» паренхимы становится значимо большим, чем в оболочке (р<0,05). Исходя из современных представлений о функциональной роли варикозных утолщений симпатических волокон как активных зон, способных к накоплению, сохранению, синтезу и захвату нейромедиаторов, циркулирующих в крови и других тканях [5 ] (рис. 2), эти процессы в связи с предыдущим фактом более выражены в варикозных расширениях нервных волокон паренхи-

Рис. 1. Динамика относительного содержания серотонина и катехоламинов в нервных волокнах оболочки и паренхимы в процессе развития желтого тела цикличности.

Содержание в варикозных расширениях терминалей серотонина—А, катехоламинов Б; содержание в межварикозных участках терминалей серотонина — Я, кате- хонаминов — Г. Буквы в скобках—то же в периваскулярных сплетениях: Сталии: васкуляризация желтого тела, II—железистый метаморфоз, III—расцвет, обратное развитие.

Но вертикали — относительное содержание (в уел. ед.) серотонина (слева) и катехоламинов (справа).

Рис. 2. Схема основных путей биоаминового обеспечения желтого тела яичника.

мы. В связи с чем можно предположить необходимость нейромедиаторных биоаминов для железистого метаморфоза клеток желтого тела. При этом катехоламины, по всей видимости, непосредственно, а не через действие гонадотропинов, вызывают в лютеоцитах повышение уровня цАМФ [16], что в определенной степени подтверждается большим увеличением содержания катехоламинов, чем серотонина в варикозных расширениях терминалей паренхимы (д<0,05; см. рис. 1).

Активная продукция стероидов лютеоцитами на стадии расцвета сопровождается дальнейшим повышением содержания нейромедиаторов (преимущественно, катехоламинов) в симпатических терминалах паренхимы (д<0,05). Большее увеличение уровня катехоламинов по сравнению с серотонином может быть объяснено их активирующим влиянием (за счет актйвации цАМФ) на образование прогестерона [11 ] '(см. рис. 1).

В варикозных расширениях периваскулярных сплетений содержание нейромедиаторов снижается, сопровождаясь увеличением этого показателя в межварикозных участках. В ПВС оболочки продолжается повышение уровня серотонина и катехоламинов (д<0,05, см. рис. 1). Все это позволяет считать, что имеющийся уровень моноаминов в терминалах паренхимы достаточен для выполнения желтым телом стероидпродуцирующей функции, а относительное увеличение их содержания в межварикозных участках свидетельствует о начинающемся обратном перераспределении «излишков» биоаминов в соответствующие структуры оболочки. Необходимо отметить, что именно на этой стадии развития желтого тела значительно возрастает биоаминпоглотительная функция макрофагов.

Наибольшие изменения в содержании серотонина и катехоламинов в биоаминпозитивных структурах желтых тел наблюдаются на стадии обратного развития (см. рис. 1). Постепенно исчезает флюоресценция терминалей между лютеоцитами сначала в центре, а затем и на периферии желтого тела. Позднее отмечается снижение площади флюоресцирующего профиля сосудов (с 4,65 + 0,49 до 3,44 + 0,18; /? < 0,01) и пространственной плотности ПВС (с 17,85+1,91 до 11,94 + 0,76; р< 0,01). Наблюдается значительное снижение этих показателей и в оболочке желтого тела (/? < 0,01).

Даже после исчезновения четкого отграничения желтого тела от окружающей ткани и значительного уменьшения его размеров сохраняется флюоресценция отдельных волокон среди остатков регрессирующего желтого тела.

Обращает на себя внимание тот факт, что на фоне общего уменьшения содержания нейромедиаторов, более выраженного в паренхиме, уровень катехоламинов по сравнению с уровнем серотонина снижается в меньшей степени. Возможно, что связано с необходимостью присутствия катехоламинов для лютеолитического действия простагландинов [9, 13]. Серотонин при этом, по нашему предположению, перераспределяется к начинающим рост фолликулам.

Несмотря на значительные колебания содержания нейромедиаторов в структурах симпатических нервных волокон, на протяжении всего периода развития желтого тела сохраняется жесткое сопряжение содержания медиаторов- антагонистов в точках зондирования (г = 0,75— 0,99), меньшая, но тоже достаточно высокая степень синхронизации содержания одноименных нейромедиаторов в структурно-транспортном сопряжении «варикоз — межварикоз».

На протяжении всего периода развития желтых тел отмечено увеличение содержания серотонина и катехоламинов в макрофагах. При этом необходимо отметить наличие высокой степени отрицательного хроносопряжения между изменениями содержания нейромедиаторов в макрофагах и симпатических нервных волокнах (как в терминалях, так и в периваскулярных сплетениях) (р=-о,8).

Следовательно, имеющее место увеличение среднего содержания моноаминов в макрофагах сопровождается уменьшением его в «варикозах» и «межварикозах» симпатических волокон. Можно считать, что подобное состояние продиктовано необходимостью усиления процессов инактивации «излишков» биоаминов путем фиксации их на липидсодержащих комплексах макрофагов.

Выводы

1. Процесс железистого метаморфоза клеток сопровождается значительным увеличением содержания серотонина и, особенно, катехоламинов в терминалях паренхимы желтого тела.
2. Более высокое содержание катехоламинов по сравнению с серотонином практически во всех элементах нервных волокон может быть объяснено их активирующим влиянием в стадии железистого метаморфоза и расцвета на стероидогенез в лютеоцитах; в стадию обратного развития — на лютеолитическое действие простагландинов.

В в ейрймедиаторнрм о беспсченин желтыт тел цикличности наряду с нервными волокнами принимают активное участие макрофаги, инактивирующие «излишки» серотонина и катехоламинов.