Динамика ряда показателей клеточного и гуморального иммунитета у больных сахарным диабетом 1 типа

Исследования последних лет, безусловно, доказывают участие иммунной системы в развитии сахарного диабета (СД)1 типа [1, 3, 4, 10, 11 14, 15, 17]. В литературе достаточно подробно представлены исследования, показывающие, что началу диабета предшествует длительный продромальный период. Установлено, что одним из проявлений этого продромального периода может быть инсулит (лимфатическая инфильтрация панкреатических островков), который тем не менее не у всех лиц приводит к развитию СД [2, 22, 23]. Инсулит сопровождается появлением в крови аутоантител, направленных против островковых клеток поджелудочной железы. Выявление ICA (антител к островкам) и ICSA (антител к поверхностному антигену островковых клеток) может свидетельствовать о доклинической или начальной стадиях СД I типа [7—9, 12, 13]. При этом ICSA являются более информативными, так как реагируют преимущественно с р-клстками, но и наименее изучены в клиническом отношении.

Развитие СД сопровождается нарастающей деструкцией р-клеток поджелудочной железы, которая может происходить и за счет увеличения активности NK-клеток (естественных киллеров) [5]. По данным некоторых авторов, количество NK-клсток при СД I типа достоверно ниже, чем у здоровых и больных сахарным диабетом II типа.

Ряд исследователей считают, что в патогенезе инсулинзависимого сахарного диабета (ИЗСД) клеточные имМуноположительные реакции играют более важную роль, чем гуморальные [6, 18]. Для характеристики состояния клеточного иммунитета большинство исследователей определяют количество Т- и В-лимфоцитов, а также регуляторные Т-лимфо- циты и их соотношения. В литературе имеются неоднозначные данные об изменении соотношения Т- хелперов и Т-супрсссоров на разных стадиях заболевания [16, 19-21].

Целью настоящего исследования явилось изучение изменения ряда показателей клеточного и гуморального иммунитета у больных СД I типа в зависимости от длительности заболевания.

Материалы и методы

Обследовано 52 больных СД I типа: 14 больных в возрасте 15—38 лет с впервые выявленным СД (1-я группа), 13 больных в возрасте 16—45 лет с длительностью заболевания от 1 года до 5 лет (2-я группа), 13 больных с длительностью СД от 6 до 10 лет (3-я группа), 12 — с длительностью СД более 10 лет (4-я группа). Средняя тяжесть заболевания выявлена у 32 больных, тяжелая форма — у 20. Больные получали инсулинотерапию препаратами “актрапид” и”ленте”. Все больные были обследованы в состоянии субкомпенсации СД, вне обострения "хронических очагов инфекции и интеркуррентных заболеваний. Контрольную группу составили 20 практически здоровых доноров.

Методом непрямой иммунофлюоресценции с использованием моноклональных антител серии Leu определяли абсолютное и относительное содержание Т- и В-лрмфоцитов в периферической крови, количество Т-хелперов и Т-супрсссоров/цитоток- сических клеток и их соотношения, количество NK-клсток, DR(+)-ktctok, уровень IgG(+) — клеток в периферической крови, наличие ICSA.

С помощью радиоиммунологического метода (с использованием стандартного набора для определения человеческого С- пептида “Ria-gnost-hC-Peptide” фирмы “Behringwerke ЛС"(ФРГ) определяли базальный уровень С-пептида.

Результаты и их обсуждение

У всех больных 1-й группы обнаруживались ICSA. У половины больных отмечалось увеличение содержания DR(+)-K4eTOK в периферической крови. У этих же больных было повышено содержание В-лимфоцитов (рис. 1, а). При индивидуальном анализе оказалось, что в состав этой группы вошли боль-

А^гЛ7&'</6’Сл5<7 Л77в7СИГ д /At/Г

/6ОО-\

/ООО-                         --------

600-

600-

4ОО-

200-

----- L1J--------------------- 11----- Ld------ L l /234

Рис. 1. Абсолютное количество В- (а) и Т-лимфоцитов (б) в периферической крови.

Здесь и на рис. 2 столбики 1—4 — цэуппы больных ИЗСД, заштрихованная часть — норма.

С04(+/с0в(+)

2-

f,5-

O.S-

о f                      2             J              4

Рис. 2. Соотношение регуляторных субпопуляций.

ные с впервые выявленным СД I типа, поступившие в клинику в состоянии кетоацидоза. При определении абсолютного и относительного содержания Т-лимфоцитов в периферической крови выявилась тенденция к их снижению (рис. 1, 6). Достоверное снижение этих показателей имело место у 8 больных, поступивших в клинику в состоянии кетоацидоза. Наряду с этим у них же выявилось значительное увеличение соотношения СД4/СД8 (рис. 2), при этом у 6 больных увеличение индекса произошло за счет повышения содержания Т-хелперов в периферической крови и у 2 — за счет снижения уровня Т-супрессоров. Содержание NK-клеток было повышено только у 4 больных с давностью манифестации заболевания, не превышающей 3 нед, а из них 3 поступили в отделение в состоянии кетоацидоза. Содержание ВЩ+)-клсток оказалось достоверно повышенным у 4 из 14 больных, у остальных 10 больных оно было нормальным или имело тенденцию к повышению.

У больных с впервые выявленным СД I типа, поступивших в клинику в состоянии кетоацидоза, в отличие от больных этой группы без кетоацидоза при поступлении и обследованных при одинаковых клинико-лабораторных показателях компенсации болезни были выявлены достоверно более выраженные изменения со стороны клеточного и гуморального звеньев иммунитета, заключавшиеся в снижении абсолютного и относительного количества Т- лимфоцитов и повышении содержания В-лимфоци- тов, NK- и В1.1+)-клеток. Кроме того, для больных с впервые выявленным СД I типа характерно изменение соотношения субпопуляций иммунорегуля- торных клеток в сторону Т-хелперов.

Во 2-й группе больных при исследовании показателей гуморального иммунитета 1CSA выявлены у 80%. Уровень п.^СД+Д-клсток периферической крови был повышен у 9 из 13 больных, у остальных отмечались нормальные значения этого показателя.

Абсолютное и относительное количество Т-лимфоцитов у 5 из 13 больных было достоверно снижено, у остальных отмечалась тенденция к снижению. Повышение В-лимфоцитов в крови имело место у 10 из 13 больных и коррелировало (/=0,6) с наличием аутоантител. У 8 из 13 больных было увеличено число NK-клеток.

В1Щ+)-клетки определялись в повышенном количестве у большинства больных (у 9) 2-й группы, и только у 4 больных их уровень приближался к норме. Индекс СД4/СД8 в данной группе достоверно не отличался от контрольного.

Из 13 больных 3-й группы 9 поступили в отделение в состоянии кетоацидоза. Только у 3 больных этой группы были выявлены HZSA. У этих же больных оказался повышенным уровень ОЩ+Дююток и увеличено содержание В-лимфоцитов. Эти данные свидетельствуют о сохраняющейся активности гуморального звена иммунной системы у некоторых больных рассматриваемой группы. Для большинства больных с длительностью заболевания от 6 до 10 лет более характерными становятся изменения в клеточном звене иммунитета. Абсолютное и относительное содержание Т-лимфоцитов имеет дальнейшую тенденцию к снижению. У 8 из 13 больных был снижен индекс СД4/СД8, причем у 6 больных за счет увеличения количества Т-супрессоров, а у 2 — за счет снижения числа Т-хелперов. Уровень NK- клеток в основном (у 10 больных) достоверно не отличался от нормы.

Таким образом, для рассматриваемой группы характерны значительное уменьшение числа больных С наличием ICSA и инверсия соотношения субпопуляций иммунорегуляторных клеток в сторону Т- супрессоров/цитотоксических.

В 4-й группе больных было выявлено достоверное снижение относительного количества Т-лимфоцитов в периферической крови. Индекс СД4/СД8 оказался достоверно сниженным за счет увеличения количества Т-супрессоров/цитотоксических клеток (см. рис. 3). В этой группе больных обнаружено также значительное увеличение относительного количества NK-клеток. У 7 из 12 человек повышено относительное количество зрелых В-лимфоцитов. У 9 из 12 больных найдены ICSA.

Выводы

1. В развитии СД I типа играют роль изменения в системе как гуморального, так и клеточного иммунитета. По мере нарастания длительности заболевания изменения клеточного звена иммунитета становятся более выраженными.
2. Наличие ICSA положительно коррелирует с содержанием В-лимфоцитов в периферической крови.

Соотношение регуляторных субпопуляций Т- лимфоцитов меняется в зависимости от длительности СД I типа — происходит его инверсия. На ранних этапах болезни выявляется повышение индекса хел- перы/супрессоры — цитотоксические клетки, а с увеличением длительности — его уменьшение.