Исследование стероидного профиля слюны методом высокоэффективной жидкостной хроматографии с тандемным масс-спектрометрическим детектированием у детей с врожденной дисфункцией коры надпочечников

ОБОСНОВАНИЕ. Лечение врожденной дисфункции коры надпочечников (ВДКН) подразумевает подбор минимально эффективной дозы гидрокортизона, по данным стероидного профиля сыворотки, что требует многократных внутривенных заборов крови. Уровни стероидных гормонов, определяемые иммуноферментным анализом, зачастую не отражают их истинную концентрацию в сыворотке в силу имеющихся ограничений метода. Кроме того, возможной причиной получения неточных данных может быть «стрессорная реакция» на процедуру забора венозной крови, что особенно актуально в детском возрасте. С целью преодоления данной проблемы в настоящее время разрабатываются альтернативные малоинвазивные методы оценки стероидного профиля у пациентов с ВДКН. В серии зарубежных исследований в качестве многообещающего альтернативного биоматериала предложена слюна. Использование слюны, в том числе с возможностью ее сбора в домашних условиях, позволяет не только исключить «стрессорный фактор» во время венепункции, повысив тем самым точность анализа, но и снизить нагрузку на средний медицинский персонал.

ЦЕЛЬ. Оценка корреляции между концентрациями стероидных гормонов в крови и слюне в пубертатной и допубертатной группе пациентов с ВДКН методом высокоэффективной жидкостной хроматографии с тандемным масс-спектрометрическим детектированием (ВЭЖХ-МС/МС).

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ. Одномоментное интервенционное исследование методов диагностики и компенсации заболевания у 45 пациентов с установленным диагнозом «ВДКН (классический дефицит 21-гидроксилазы)» в возрасте от 3 до 17 лет. Всем детям проведено одномоментное лабораторное исследование в ГНЦ РФ ФГБУ «НМИЦ эндокринологии» Минздрава России в октябре 2024 г.

РЕЗУЛЬТАТЫ. В допубертатной группе (N=14) выявлена сильная положительная корреляция между концентрациями стероидов в соответствующих образцах сыворотки и слюны для концентрации 17ОН-прогестерона (р<0,001; r=0,88), андростендиона (р<0,001; r=0,84) и дигидроэпиандростерона (р=0,001; р=0,78). В пубертатной группе (N=31) выявлена сильная положительная корреляция между концентрациями стероидов в соответствующих образцах сыворотки и слюны для концентрации 17ОН-прогестерона (р<0,001; r=0,94), андростендиона (р<0,001; r =0,94), тестостерона (р<0,01; r=0,94) и прогестерона (р<0,001; r=0,79), а также умеренная корреляция для 21-дезоксикортизола (р=0,003; r=0,52).

ЗАКЛЮЧЕНИЕ. Для большинства стероидов, используемых для диагностики и контроля проводимой терапии у пациентов с ВДКН, выявлена сильная или умеренная корреляция между концентрациями стероидов в соответствующих образцах сыворотки и слюны.

1. Auer MMK, Nordenström A, Lajic S, et al. Congenital adrenal hyperplasia. The Lancet. 2023;401(10372)ж227–244. doi: https://doi/org/10.1016/S0140-6736(22)01330-7

2. Mokrysheva NG, Melnichenko GA, Adamyan LV, Troshina EA, Molashenko NV, et al. Russian clinical practice guidelines «congenital adrenal hyperplasia». Obesity and metabolism. 2021;18(3):345-382. doi: https://doi.org/10.14341/omet12787

3. Wong T, Shackleton CH, Covey TR, et al. «Identification of the steroids in neonatal plasma that interfere with 17 alpha-hydroxyprogesterone radioimmunoassays. Clin Chem. 1992;38(9):1830-7

4. Ионова Т.А., Калинченко Н.Ю., Тюльпаков А.Н., и др. Сравнительный анализ эффективности методов иммуноанализа и тандемной масс-спектрометрии при ретестировании детей с подозрением на врожденную дисфункцию коры надпочечников // Проблемы эндокринологии. 2013. — Т. 59. — №2. — С. 12-18.

5. Гончаров Н.П., Колесникова Г.С. Биохимические маркеры врожденной дисфункции коры надпочечников и нарушений стероидогенеза. // Проблемы Эндокринологии. — 2007. — Т.53. — №1. — С.30-33. doi: https://doi.org/10.14341/probl200753130-33

6. Claahsen-van der Grinten, Hedi L, et al. Congenital Adrenal Hyperplasia-Current Insights in Pathophysiology, Diagnostics, and Management. Endocrine reviews. 2022;43(1):91-159. doi: https://doi.org/10.1210/endrev/bnab016

7. de Hora M, Heather N, Webster D, Albert B, Hofman P. The use of liquid chromatography-tandem mass spectrometry in newborn screening for congenital adrenal hyperplasia: improvements and future perspectives. Front Endocrinol (Lausanne). 2023;14:1226284. doi: https://doi.org/10.3389/fendo.2023.1226284

8. Wudy SA, Schuler G, Sánchez-Guijo A, Hartmann MF. The art of measuring steroids: Principles and practice of current hormonal steroid analysis. J Steroid Biochem Mol Biol. 2018;179:88-103. doi: https://doi.org/10.1016/j.jsbmb.2017.09.003

9. Abawi O, Sommer G, Groessl M, Halbsguth U, Hannema SE, et al. THU208 Predicting Treatment Quality Assessment Of Children With Congenital Adrenal Hyperplasia Using 24h Urine Metabolomics Profiling And A Machine Learningassisted Approach. J Endocr Soc. 2023;7(Suppl 1):bvad114.1459. doi: https://doi.org/10.1210/jendso/bvad114.1459

10. Nowotny HF, Auer MK, Lottspeich C, Schmidt H, Dubinski I, et al. Salivary Profiles of 11-oxygenated Androgens Follow a Diurnal Rhythm in Patients With Congenital Adrenal Hyperplasia. J Clin Endocrinol Metab. 2021;106(11):e4509-e4519. doi: https://doi.org/10.1210/clinem/dgab446

11. Kamrath C, Hartmann MF, Pons-Kühnemann J, Wudy SA. Urinary GC-MS steroid metabotyping in treated children with congenital adrenal hyperplasia. Metabolism. 2020;112:154354. doi: https://doi.org/10.1016/j.metabol.2020.154354

12. Bacila IA, Lawrence NR, Badrinath SG, Balagamage C, Krone NP. Biomarkers in congenital adrenal hyperplasia. Clin Endocrinol (Oxf ). 2024;101(4):300-310. doi: https://doi.org/10.1111/cen.14960

13. Bacila I, Adaway J, Hawley J, Mahdi S, Krone R, et al. Measurement of Salivary Adrenal-Specific Androgens as Biomarkers of Therapy Control in 21-Hydroxylase Deficiency. J Clin Endocrinol Metab. 2019;104(12):6417-6429. doi: https://doi.org/10.1210/jc.2019-00031

14. Adriaansen BPH, Kamphuis JS, Schröder MAM, et al. Diurnal salivary androstenedione and 17-hydroxyprogesterone levels in healthy volunteers for monitoring treatment efficacy of patients with congenital adrenal hyperplasia. Clin Endocrinol (Oxf ). 2022;97(1):36-42. doi: https://doi.org/10.1111/cen.14690

15. Dubinski I, Bechtold S, Bidlingmaier M, Reisch N, Schmidt H. Salivary 17-Hydroxyprogesterone Levels in Children with Congenital Adrenal Hyperplasia: A Retrospective Longitudinal Study Considering Auxological Parameters. Horm Res Paediatr. 2023;96(3):259-266. doi: https://doi.org/10.1159/000526485

16. Merke DP, Mallappa A, Arlt W, Brac de la Perriere A, et al. J Clin Endocrinol Metab. 2021;106(5):e2063-e2077. doi: https://doi.org/10.1210/clinem/dgab051

17. Тюльпаков М.А., Нагаева Е.В., Калинченко Н.Ю. и др. Оценка стероидного профиля в слюне у пациентов с врожденной дисфункцией коры надпочечников. // Проблемы Эндокринологии. — 2024. — Т. 69. — №6. doi: https://doi.org/10.14341/probl13328-10593

18. Tiulpakov M, Ioutsi V, Kalinchenko N, и др. Salivary Steroids Quantification by HPLC-MS/MS:Comparative Evaluation of Sample Collection Methods for Analysis in Patients with Congenital Adrenal Hyperplasia. J Anal Bioanal Tech. 15:667. doi: https://doi.org/10.4172/2155-9872.1000667

19. Ioutsi VA, Panov YM, Usol’tseva LO, et al. Analysis of Serum Estrogens Using High-Performance Liquid Chromatography– Tandem Mass Spectrometry Coupled to Differential Ion Mobility Spectrometry. J Anal Chem. 2022;77:1760–1766. doi: https://doi.org/10.1134/S1061934822140027

20. Rauh M. Steroid measurement with LC-MS/MS in pediatric endocrinology. Molecular and cellular endocrinology. 2009; 301(1-2):272-81. doi: https://doi.org/10.1016/j.mce.2008.10.007/