Особенности иммунного статуса у больных ишемической болезнью сердца с ожирением и атерогенной дислипидемией

С начала 70-х годов предположению о возможном вовлечении иммунологических механизмов в патогенез атеросклероза придается особое значение. Представляется, что оба (гуморальный и клеточный) механизма участвуют в начале развития и прогрессировании атеросклеротического повреждения. Найдено 2 различных иммунологических пути, ведущих к атеросклерозу: аутоиммунный ответ на окисленные липопротеиды низкой плотности (ЛПНП) и аутоиммунный ответ на белки теплового шока [6]. С активацией иммунной системы связывают также появление микроангиопатий при сахарном диабете [1, 5].

Многими исследованиями доказано, что факторами риска для атерогенеза являются компоненты метаболического синдрома, включающие в себя присутствие маленьких плотных ЛПНП, высокие уровни триглицеридов и низкие уровни липопротеидов высокой плотности (ЛПВП), абдоминальное ожирение, которое ассоциируется с резистентностью к инсулину и артериальной гипертензией [3, 4, 9]. Исходя из вышеизложенного, можно ожидать более выраженных изменений иммунного статуса у больных коронарным атеросклерозом, абдоминальным ожирением и атерогенным фенотипом липопротеидов по сравнению с больными ишемической болезнью сердца (ИБС) без ожирения и дислипидемии.

Целью настоящей работы явились сравнительное исследование некоторых показателей иммунного статуса и микроциркуляции у больных ИБС с абдоминальным ожирением и атерогенной дислипидемией и у больных ИБС с нормальной массой тела без нарушений липидного спектра крови, а также поиск связей между иммунологическими и метаболическими показателями.

Материалы и методы

Исследование микроциркуляции проведено методом биомикроскопии конъюнктивы в 3 группах обследованных: 1-я группа — 17 больных ИБС без ожирения и нарушений липидного обмена (возраст 48,1 ± ± 2,2 года, индекс массы тела — ИМТ 23,5 ± 0,4 кг/м², общий холестерин — ХС 5,7 ± 0,2 ммоль/л); 2-я группа — 21 больной ИБС с ожирением и гиперлипидемией (возраст 53,2 ± 1,4 года, ИМТ 32,6 ± ± 0,8 кг/м², общий ХС 8,0 ± 0,3 ммоль/л, наличие артериальной гипертензии) и 3-я (контрольная) группа — 27 здоровых мужчин без ожирения и с нормальным липидным спектром крови (возраст 52,4 ± 1,5 года). Иммунный статус исследовали у 8 больных ИБС без ожирения и дислипидемии (группа А), 10 больных ИБС с абдоминальным ожирением и дислипидемией (группа Б) и 20 здоровых доноров без ожирения и с нормальным липидным спектром крови в качестве контроля (группа В) (возраст 32—50 лет). Коронарный атеросклероз в группах А и Б документирован ангиографически. Характеристика больных групп А и Б представлена в табл. 1. В данное исследование вошли только лица мужского пола.

Оценка иммунного статуса. Субпопуляции Т-лимфоцитов (CD4⁺, CD8⁺, CD95⁺) определяли методом непрямой иммунопероксидазной реакции с использованием моноклональных антител на препаратах лимфоцитов типа высушенной капли производства Онкологического научного центра

Характеристика больных групп А и Б

Примечание. * — р < 0,05; **р < 0.01 по сравнению с группой А.

РАМН (Москва). Циркулирующие иммунные комплексы (ЦИК) определяли, используя тест-системы производства РЕА (Чита).

Биомикроскопия конъюнктивы глазного яблока. Изучение микроциркуляции проводили путем визуального исследования микрососудов конъюнктивы с помощью щелевой лампы ЩЛ-56. При интерпретации результатов использовали систему качественно-количественной оценки, представляющую собой систему баллов сосудистых, внесосудистых и внутрисосудистых изменений. Сумма баллов представляет собой конъюнктивальный индекс (КИ), максимальное значение которого составляет 48. Наряду с общим КИ определяли парциальные индексы: КИ,, отражающий внесосудистые изменения; KHj, выявляющий нарушения архитектоники микрососудов, и КИ3, отражающий изменения микрогемодинамики и реологических свойств крови. Максимальные значения КИ|, КИ2 и КИ₃ составили 4, 24 и 20 баллов соответственно.

Статистические методы. Результаты представлены как средняя арифметическая ± ошибка средней. Различия между средними значениями анализировали с помощью /-критерия Стьюдента. Вычисляли также коэффициенты парной корреляции.

Результаты и их обсуждение

В настоящем исследовании анализировали субпопуляции циркулирующих лимфоцитов, обладающих контактной цитотоксичностью (CD4⁺, CD8⁺), активированные Т-лимфоциты с рецептором Fas/APO = 1 (CD95⁺), маркером апоптоза. ЦИК с IgM. Определяли также отношение CD4⁺/CD8⁺. Полученные данные в исследуемых группах суммированы в табл. 2.

Таблица 2

Результаты исследования субпопуляций Т-лимфоцитов, отношения CD4⁺/CD8⁺, уровней ЦИК с IgM (М ± т)

Показатель

CD4 ⁺клетки • 10⁹/л CD8⁺клетки • 10⁹/л CD95⁺клетки • 10⁹/л CD4⁺/CD8⁺клетки, усл. ед.

ЦИКе IgM. г/л

1,68 ± 0,16

1,53 ± 0,38

Группа В (л = 20)

0,89 ± 0.09

0.58 ± 0,08

0,67 ± 0,06

Примечание. * — р < 0,01 по сравнению с группой В (контроль); ** — р < 0.05 по сравнению с группой Б (ИБС с ожирением и дислипидемией); *** — достоверные различия данных между группами.Как следует из табл. 2, в группе больных ИБС с ожирением и дислипидемией выявлены самые высокие уровни цитотоксических Т-лимфоцитов — ЦТЛ (CD8⁺) и Т-клеток с молекулой Fas (0,94 ± ± 0,1010⁹/л; 1,21 ± 0,1610⁹/л), достоверно отличающиеся от соответствующих показателей в группе больных ИБС без ожирения (0,59 ± 0,14 • 10⁹/л; 0,68 ± 0,0910⁹/л; р < 0,05) и в контроле (0,58 ± ± 0,0810⁹/л; 0,67 ± 0,0610⁹/л; р < 0,01). Количество Т-хелперов (CD4⁺) в группе больных ИБС с ожирением и дислипидемией (0,88 ± 0,12 • 10⁹/л) не отличалось от такового в контрольной группе (0,89 ± 0,0910⁹/л), но было значимо выше (р < 0,05), чем в группе больных ИБС без ожирения и дислипидемии (0,51 ± 0,08 • 10⁹/л). Отношение CD4⁺/CD8⁺ в группах больных ИБС было ниже 1 и существенно отличалось от группы здоровых лиц, где данное отношение составило 1,68. Это свидетельствует об относительном преобладании ЦТЛ среди больных с коронарным атеросклерозом. Группы больных ИБС отличались также аномально высокими концентрациями ЦИК с IgM (3,74 ± ± 0,53 г/л в группе А и 4,58 ± 0,54 г/л в группе Б), которые достоверно превышали уровень ЦИКе IgM в контрольной группе (1,53 ± 0,38 г/л). Данный факт отражает аутосенсибилизацию; можно полагать, что токсические концентрации ЦИК способствуют повреждению микрососудов. Это предположение подтверждают полученные нами результаты биомикроскопии конъюнктивы.

Результаты исследования микроциркуляции представлены в табл. 3. Как видно из табл. 3, общий КИ и парциальные индексы в группах больных ИБС существенно отличались от контроля (р < 0,001), однако самые выраженные изменения микроциркуляции выявлены у больных с ожирением и гиперлипидемией, во 2-й группе найдены самые высокие значения всех КИ.

Изучение экспрессии антигена Fas на субпопуляциях лимфоцитов периферической крови показало, что он представлен на CD8⁺и СЭ4⁺-лимфоцитах, несущих CD45-ИО-антиген, являющийся маркером Т-клеток памяти. Аномальная активация (с усилением функции) Fas-рецептора или Fas-лиганда может участвовать в патогенезе различных заболеваний, таких как ишемические повреждения различных органов или ЦТЛ-опосредованные аутоиммунные процессы [2, 7].

Нами выявлены корреляционные зависимости между CD4⁺ и CD95⁺ (г = +0,85; р < 0,001), а также

Таблица 3

Результаты исследования сосудов конъюнктивы глазного яблока

Достоверные коэффициенты корреляции показателей иммунного статуса с другими изучаемыми показателями

между CD4⁺ и CD8⁺ (г = +0,71; р < 0,01) у больных с ожирением и атерогенной дислипидемией.

Установлены связи между иммунологическими и метаболическими показателями, что отражено в табл. 4.

Таким образом, наши данные позволяют сделать заключение о том, что молекула Fas (CD95⁺) обнаруживает статистически значимые корреляционные связи с показателями липидного спектра крови, с ИМТ и креатинфосфокиназой. Доказано, что Fas-рецептор экспрессируется не только в тимоцитах и лимфоцитах, но и в других тканях, включая печень, легкие, сердце [8]. При взаимодействии с этими клетками ЦТЛ последние могут активироваться через Т-клеточный рецептор и стимулировать ген Fas-лиганда. Fas-лиганд затем связывается с Fas-рецептором на клетках-мишенях, что вызывает апоптоз [2, 7].

Из большого количества заболеваний, возможно, связанных с апоптозом и требующих изучения, 2 проблемы являются наиболее актуальными — это атеросклероз и возрастные изменения сердца.

Выводы

1. У больных ИБС с абдоминальным ожирением и атерогенным фенотипом липопротеидов установлены достоверное повышение уровня ЦТЛ и активация Fas-системы, выявлены более выраженные нарушения микроциркуляции конъюнктивы глазного яблока по сравнению с группой ИБС без ожирения и дислипидемии.
2. Обнаружена связь между активацией иммунной системы, абдоминальным ожирением и липидными нарушениями атерогенной направленности.
3. Выявлена корреляционная зависимость между активированными Т-лимфоцитами с Fas-рецептором (маркером апоптоза) и активностью сывороточной креатинфосфокиназы, отражающей процесс тканевого повреждения.